【摘 要】
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针对近年来严重影响中国烟草生产的烟草赤星病和几种重要蔬菜真菌病害,筛选出新型的杀真菌农用抗生素TS99,并对其产生菌YH04的分类、菌种选育、发酵条件、分离纯化工艺及其作
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针对近年来严重影响中国烟草生产的烟草赤星病和几种重要蔬菜真菌病害,筛选出新型的杀真菌农用抗生素TS99,并对其产生菌YH04的分类、菌种选育、发酵条件、分离纯化工艺及其作用机理进行了系统的研究.结果如下:1、从广东、云南、湖北、山东、辽宁、吉林、黑龙江等地区采集的30余份土样中筛选到对烟草赤星病菌和辣椒炭疽病菌等植物病原真菌有抑制作用的链霉菌1 5株.2、在形态学和化学分类的基础上,通过分子生物学方法对抗生素TS99产生菌YH04进行了分类鉴定.3、在明确链霉素对菌株YH04孢子的致死浓度为1.2μg/mL的前提下,结合菌株的表型变异,通过不同剂量的紫外诱变对其孢子进行诱变处理,再以链霉素致死浓度为选择压力,获得了大量链霉素抗性基因突变株,进而从中筛选到发酵效价较出发菌株提高60％以上、遗传稳定性良好的高产菌株YH9407.4、菌株YH9407摇瓶发酵的最佳碳源是可溶性淀粉,最佳有机氮源为花生饼粉和酵母粉,无机氮源为硫酸铵.5、TS99为分泌型抗生素,即存在于发酵液中.发酵液经4~5倍无水乙醇或丙酮溶液沉淀后,通过大孔网状树脂交换吸附、硅胶柱吸附层析、薄层层析等方法分离纯化,再用过量的乙醚结晶、冷冻干燥即可得到纯度为95.32%的TS99纯品.6、TS99为淡黄色粉末状物质,中性,易溶于水、二甲基亚砜、含水乙醇、含水甲醇及含水丙酮;微溶于正丁醇、甲醇和吡啶;不溶于氯仿、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸戊酯、苯、乙醚、石油醚和正己烷等有机溶剂.其纸层析结果和紫外吸收特性符合四烯类抗生素的图谱特征.在波长λmax292nm、λmax305nm和λmax320nm处表现为典型的3个吸收峰.
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