电活性P(VDF-TrFE)膜对人脐静脉血管内皮细胞成血管功能影响的研究

来源 :南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hnwkn2008
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研究背景由创伤、肿瘤及牙周炎等疾病导致的骨缺损是口腔修复领域面临的一大难题。目前,引导性骨再生技术是临床中应用较为广泛的骨增量方案之一。屏障膜的应用对该技术的预后起着不可忽视的作用。现今多数屏障膜由仅具有物理屏障功能的惰性材料组成,缺乏生物活性。因此,有必要继续开发具有生物活性的屏障膜。在骨再生过程中,新生血管起着至关重要的作用。既往研究发现,生物电信号会影响血管生成。然而,目前关于不同电性的材料对血管生成的影响还尚未明确。因此,本课题组制备了不同表面电势的电活性聚偏氟乙烯-三氟乙烯膜(Poly(vinylidenefluoridetrifluoroethylene),P(VDF-TrFE)),探讨其对人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性及成血管功能的影响。研究目的本课题组制备具有不同表面电势的电活性P(VDF-TrFE)膜,探讨其在体外对HUVECs细胞活性、增殖、迁移及成血管功能的影响。研究方法首先通过流延法制备P(VDF-TrFE)膜,采取油浴极化的方式进行极化处理。实验分组设置为负极化组、正极化组、非极化组及空白对照组。使用扫描电镜、水接触角检测材料表征。使用傅里变换红外光谱仪、X射线衍射仪检测材料的晶形。通过测量表面电势分析材料电学性能变化。在直接接触实验中使用活死染色、CCK-8试剂盒检测细胞活性。使用荧光显微镜观察细胞形态,通过划痕实验观察HUVECs迁移。通过成管实验观察材料对HUVECs成管能力的影响,使用实时荧光定量聚合酶链式反应,免疫印迹试验检测材料对HUVECs血管生成相关因子表达水平的影响。研究结果1.极化处理后P(VDF-TrFE)膜β相含量升高,材料表面携带不同的表面电势。极化处理后未改变材料表面形貌及湿润性(P>0.05)。2.体外实验结果显示材料无明显细胞毒性,细胞在材料表面形态均匀铺展,负极化组促进HUVECs细胞增殖及细胞迁移(P<0.05)。3.实验结果显示负极化组促进了HUVECs管状结构的形成(P<0.05),并且提高了血管内皮生长因子的基因及蛋白表达水平(P<0.05),以及血小板-内皮细胞粘附分子基因表达水平(P<0.05)。研究结论1.本实验中制备的电活性P(VDF-TrFE)膜表面形成不同的表面电势,具有良好稳定的电学性能。2.负极化组电活性P(VDF-TrFE)膜在体外试验中具有良好的促血管生成活性。临床意义经负极化处理后的电活性P(VDF-TrFE)膜在体外试验中表现出良好的细胞相容性及促血管生成活性,未来有望作为新型电活性屏障膜应用于临床。
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