化痰通瘀解毒方水提取物对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xiaxia904
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目的:观察化痰通瘀解毒方(Huatan-Tongyu-Jiedu Decoction,HTJD)水提取物对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力及其wnt/β-catenin信号转导通路相关蛋白表达的影响,探讨化痰通瘀解毒方抗人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移的机制。方法:分别以不同浓度HTJD水提取物(5、10、20、30、40μg/m L)干预人胃癌SGC-7901细胞24h,分别采用Transwell法和划痕实验检测其对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响;采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测人胃癌细胞SGC-7901 E-钙黏蛋白(Epithelial cadherin,E-cad)、基质金属蛋白酶-2(matrix metallopro-teinase 2,MMP-2)、环氧化酶-2(Cyclo-oxygena se-2,Cox-2)和分化抗原簇44变异体6(44Cluster of differentiation variants6,CD44v6)蛋白表达水平;采用免疫印迹法(Western blotting)检测其对人胃癌SGC-7901细胞中Wnt基因家族因子1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、结肠腺瘤性息肉蛋(Adenomatous polyposis of the colon protein,Apc)相对表达量。结果:1、对人胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移能力的影响与空白对照组比较,HTJD 10μg/m L、20μg/m L、30μg/m L、40μg/m L剂量组Transwell实验中细胞穿膜个数明显变少,划痕愈合距离△d明显减小(P<0.05 or P<0.01)。2、对人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移相关因子表达的影响与空白对照组比较,HTJD 10、20、30、40μg/m L剂量组SGC-7901细胞的E-cadherin表达量明显升高(P<0.05 orP<0.01),在20、30、40μg/m L剂量组间呈现一定剂量依赖性;MMP-2、COX-2和CD44v6表达量明显减少(P<0.05 or P<0.01)。在20、30、40μg/m L剂量组间呈现一定剂量依赖性(P<0.05)。3、对人胃癌SGC-7901细胞Wnt/β-catenin信号转导通路相关蛋白表达的影响:与空白对照组比较,HTJD 10、20、30、40μg/m L剂量组SGC-7901细胞的Wnt1、β-catenin蛋白较空白对照组显著降低(P<0.05,或P<0.01),在20、30、40μg/m L剂量组间呈现一定剂量依赖性(P<0.05)并在APC、GSK-3β在用药后,蛋白表达较空白对照组有所升高(P<0.05.)结论1、化痰通瘀解毒方可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移能力,可上调人胃癌SGC-7901细胞E-cadherin、下调MMP-2、COX-2和CD44v6表达;2、化痰通瘀解毒方抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移作用与其调控Wnt/β-catenin信号转导通路相关蛋白表达密切相关。
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