论文部分内容阅读
皖南花猪是优良的安徽省地方猪种，其优点主要在于肉质好和繁育性能强。脂肪组织不仅是一个储存脂肪组织。脂联素（Adiponectin,Adp）是由脂肪组织分泌的细胞因子，到目前为止它是唯一伴随脂肪变多而它的血液浓度却是降低的细胞因子。本实验通过分析肾周脂肪、皮下脂肪中脂联素及其受体基因水平差异，旨在探讨脂联素和皖南花猪肉质的内在关系。研究重组脂联素对肌内脂肪细胞的作用，探讨脂联素对猪肉质的影响和作用机制。1皖南花猪脂肪组织中脂联素及其受体基因的表达从皖南花猪繁育中心挑选4头皖南花猪试验，常规条件下饲养。养至90d屠宰，屠宰前禁食12h，采集皮下脂肪组织和肾周脂肪组织，采用相对定量实时荧光PCR方法检测中脂联素（Adp）、脂联素受体1（AdipoR1）、脂联素受体2（AdipoR2）mRNA表达。结果显示：（1）Adp mRNA在皮下脂肪的表达显著高于肾周脂肪（P<0.05）；AdipoR1、AdipoR2mRNA在皮下脂肪的表达极显著（P<0.01）高于肾周脂肪。（2）皖南花猪皮下脂肪Adp与AdipoR1、AdipoR2显著相关（r=0.60，P<0.05；r=0.57，P<0.05）；皖南花猪肾周脂肪Adp与AdipoR1、AdipoR2显著相关（r=0.31，P<0.05；r=0.37，P<0.05）。以上结果表明：表明脂肪组织表达Adp及其受体，皮下脂肪可能是Adp的主要来源；且是Adp调节的主要部位。2脂联素对猪肌内脂肪细胞的影响及其机制挑选5d皖南花猪背最长肌组织，分离出实验所需的前体肌内脂肪细胞，到细胞融合80%以上，传代继续培养，用不同浓度重组脂联素（recombinant adiponectin，rAdp）处理，通过油红O染色法鉴定，MTT方法测定细胞活力；利用qRT-PCR方法测Adp、AdipoR2、AdipoR1、PPARα和AMPK mRNA的表达量。显示，脂肪细胞活力在添加rAdp后有降低趋势，2μg/ml作用24h到达显著差异水平（P <0.05）；rAdp处理12h后，脂肪细胞AdipoR1和AdipoR2mRNA表达水平显著升高（P <0.05），AMPKmRNA表达量显著下降（P <0.05），没有剂量依赖性。用rAdp处理细胞48h，AdpmRNA表达量显著下降（P <0.05），PPARα mRNA表达量显著升高（P <0.05），剂量效应不是很明显；AMPK mRNA表达量在10μg/mL rAdp处理组显著升高（P <0.05）。Coumpound C处理阻断rAdp处理后导致的AMPK mRNA表达量降低。提示：重组脂联素处理猪肌内脂肪细胞有降低细胞活力作用，能上调AdipoR1、AdipoR2基因表达，影响PPARα和AMPK基因的表达，从而对肌内脂肪细胞起调节作用。