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目的 研究中药生脉成骨胶囊药物血清促进血管生成的作用机理,以及对人脐静脉内皮细胞株分泌内皮素1、前列环素I2和一氧化氮等血管活性物质的影响。为生脉成骨胶囊临床用于治疗股骨头缺血性坏死,改善股骨头血液供应提供实验依据;并通过临床观察验证生脉成骨胶囊促进坏死股骨头及其周围血管生成的效果。从现代药理学角度阐明“瘀去则新生脉长”的中医基础理论。 方法 在复习治疗性血管生成的研究进展和临床应用的基础之上,结合该项国家自然科学基金(No.30171143)和广东省自然科学基金(No.010251)资助项目已经取得的阶段性成果,本博士课题分为基础实验和临床观察两部分进行研究。 基础实验:应用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法研究生脉成骨胶囊药物血清对体外培养的人脐静脉细胞株(ECV304)增殖的影响,利用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测生脉成骨胶囊药物血清作用1h和2h后ECV304细胞培养上清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度,采用ELISA法检测生脉成骨胶囊药物血清作用1h和2h后,ECV304细胞培养上清中内皮素1(endothelin-1,ET-1)和前列环素I2(prostacyclin I2,PGI2)浓度,用硝酸还原酶法检测生脉成骨胶囊药物血清作用1h和2h后,ECV304细胞培养上清中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,应用透射电镜技术观察生脉成骨胶囊药物血清作用12h后各组ECV304细胞的超微结构。所得数据以SPSS10.0软件进行统计分析。 临床观察:将纳入研究的股骨头缺血性坏死患者分为单纯介入治疗组(对照组)和中药加介入治疗组(中药组),通过数字减影血管成像技术(digital substraction angiography,DSA)观察治疗前及治疗2个月后的坏死股骨头及其周围血管成像,利用JVC ky-F30B 3-CCD彩色图像摄录输入仪进行图像采集及Kontron iBAS 2.0全自动图像分析系统计算出治疗前后的股骨头及其周围血管成像区域灰度值,并取其差值,以t检验进行统计分析。