吗啡(morphine)对中枢神经系统产生广泛而复杂的作用。抗坏血酸(ascorbic acid, AA)具有抗氧化以及酶的辅助因子等多种作用,并且在中枢神经系统中发挥着重要的神经调质作用。调节AA的释放可能是成瘾性药物的共同特征。我们研究发现大鼠伏隔核(nucleus accumbens, NAc)透析给予吗啡与全身给予吗啡时引起NAc内AA释放的结果不同,提示不同方式给予吗啡引起NAc中AA的释放存在不同的调节机制。基于此,本文从神经生化、行为学和分子生物学等多个水平研究吗啡引起NAc内AA释放的作用机制,以期为吗啡中枢作用机制研究提供理论依据。首先采用脑微透析结合高效液相色谱-电化学检测和高效液相色谱-荧光检测方法考察了局部NAc透析给予吗啡引起NAc内AA、谷氨酸(glutamate, Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminubutiric acid, GABA)释放的影响。随之考察阿片受体拮抗剂纳洛酮对吗啡作用的影响。结果表明,吗啡(100μM,1mM)能够剂量依赖性地增加NAc内AA和GABA的释放,降低Glu的释放。给予纳洛酮能够显著抑制吗啡引起NAc内AA释放的增加,同时能够抑制吗啡引起的GABA释放的升高,但不影响吗啡引起的Glu的降低。提示吗啡至少是部分通过作用于阿片受体,尤其是NAc内p受体,而产生的对AA和GABA释放的一系列作用。进一步采用海人藻酸(kainic acid, KA)损毁NAc考察其对吗啡作用的影响。结果表明,NAc损毁抑制了吗啡引起NAc内AA和GABA释放的增加,但不影响吗啡引起的Glu释放降低。提示,KA损毁可能导致了NAc内主要的GABA神经元的缺失从而产生一系列效应。为了验证上述推测,又采用NAc局部注射GABAA受体激动剂muscimol考察其对NAc损毁后吗啡作用的影响。结果表明,muscimol能够逆转KA损毁NAc引起的吗啡对AA和GABA释放的抑制作用,提示NAc内GABA能系统在一定程度上参与了吗啡引起的NAc内AA的释放。此外,采用KA损毁NAc的方法,考察其在影响吗啡引起生化水平改变的同时,是否会对吗啡引起的行为学改变产生影响。结果表明,KA损毁NAc能够增加单次吗啡引起的大鼠水平和垂直运动次数；能够部分地阻断大鼠急性成瘾时的戒断症状；强化吗啡对小鼠的镇痛作用；不影响吗啡诱导的小鼠行为敏化的形成,但能阻断吗啡诱导的小鼠行为敏化表达。提示NAc作为中脑边缘重要核团,在吗啡引起的相关行为学中发挥着重要作用。NAc接受来自其他脑区的神经投射。本文进一步考察了前额叶皮层Glu能系统和腹侧被盖区(ventral tegmental area, VTA)对伏隔核的神经投射对吗啡引起AA释放的影响。结果表明,前额叶皮层-NAc的Glu能神经投射降低NAc内的Glu基础释放,不影响GABA基础释放,进一步确证了前额叶皮层-NAc的谷氨酸能神经投射不是参与吗啡作用的主要因素。VTA内注射GABAA受体拮抗剂bicuculine和激动剂muscimol影响NAc中AA的基础释放,muscimol不影响吗啡的作用,但bicuculine能够拮抗吗啡引起的NAc中AA和GABA释放的增加；同时,VTA内注射bicuculine显著升高多巴胺(dopamine, DA)的基础释放,降低NAc中GABA的基础释放,而muscimol作用与之相反。提示VTA到NAc的神经投射可能参与了吗啡引起的NAc中AA释放过程。已知脑内AA主要是通过Na+依赖的AA转运体(SVCT2)转运入脑和神经元从而发挥作用的,并且能够逆浓度梯度在细胞内聚集AA。本文进一步采用RT-PCR、Western blot的方法,考察了上述研究过程中吗啡对脑内AA转运体表达的影响。结果表明,全身给予吗啡能够剂量依赖性地增加纹状体中SVCT2 mRNA和蛋白的表达；NAc透析给予吗啡能够增加NAc内SVCT2 mRNA和蛋白的表达；NAc给予纳洛酮和VTA给予bicuculine能够拮抗吗啡引起的NAc中SVCT2 mRNA和蛋白表达的增加。提示,在吗啡通过作用于受体及神经系统等引起NAc内AA水平改变的过程中,SVCT2可能发挥着重要作用。综上,NAc内的GABA能神经系统参与了吗啡引起的NAc中AA的释放；KA损毁NAc不但改变吗啡的神经生化水平作用,还影响吗啡镇痛和行为敏化的行为学作用；前额叶皮层-NAc的Glu能神经通路在吗啡引起NAc内AA释放过程中可能不发挥主要作用,而VTA-NAc的DA能神经通路参与了吗啡的作用。在吗啡引起AA释放的同时,对SVCT2的表达也产生影响。上述研究不仅有助于深入了解吗啡对NAc内AA释放的调节机理,同时也为进一步了解吗啡中枢作用提供依据。