多肽毒素存在于自然界的很多生物物种中,生物学活性是多肽毒素研究一个极为重要的方面.综述了多肽毒素的生物学活性及相应的研究方法.通过离子交换和反相-HPLC从海南捕鸟蛛粗毒分离了海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ,MALDI-TOF测定其分子量为3988.70,通过氨基酸组成分析、Cys烷基化修饰、Lys-C酶水解后HPLC分离片段序列测定和羧肽酶-Y C-端测序确定了其氨基酸序列为:ECLGFGKGCNPSNDQCCKSSNLVCSRKHRWCK-YEI,该序列与从虎纹捕鸟蛛分离的HWTX-Ⅳ只相差7个氨基酸残基.其中6个Cys形成3对二硫键,在pH3的条件下利用TCEP对海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ进行了部分还原,收集RP-HPLC的洗脱峰,用碘乙酰胺烷基化修饰游离的-SH,经质谱鉴定后进行氨基酸序列测定,由此确定了Cys2-Cys17、Cys9-Cys24和Cys16-Cys31形成了1-4、2-5和3-6的二硫键配对方式.小鼠急性毒性实验确定海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ的LD<,5>0为0.20±0.07mg/kg,而对美洲蜚蠊却没有影响.海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ能使电刺激引起的大鼠输精管收缩产生先兴奋后抑制的作用,而对电刺激诱导的小鼠膈神经-膈肌收缩却只产生抑制作用,浓度为1.0×10<-6>mo1/L时的阻断时间为1 8.1±0.2min(n=5),同时它对由去甲肾上腺素引起的输精管收缩和直接电刺激肌肉引起的膈肌收缩没有影响,推测其具有神经专一性.电生理实验表明海南捕鸟蛛毒素-Ⅳ能完全阻断TTX-敏感型的钠通道,而对钠通道的激活和失活没有影响,从而推测其是一种位点-1毒素.