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本文采用ERs基因重组酵母模型筛选植物单体和植物醇提物,旨在寻找天然植物雌激素。
考察了ERs基因重组酵母模型中化学法和酶法对酵母细胞破壁效果的影响。最终确定采用酶法破壁检测液(60mMNa2HPO4,40mMNaH2PO4,10mMKCl,1mMMgSO4,2mg/mLoNPG,38mMβ-巯基乙醇,0.01‰TritonX-100,15U/mLlyticase),可使破壁和β-半乳糖苷酶反应一次完成。
采用ERs重组酵母模型测定18种植物单体的体外雌激素活性。其中芦丁、异槲皮素被检出有较强的体外雌激素活性;人参皂苷Rb1、Ck、S-Rh2、R-Rh2、Rg1、Re被检出有弱的体外雌激素活性;人参皂苷F2、Rb2、Rc、Rd、Rg3、Rg5、Rh3、Rg2、Rh1、红景天苷未检出有体外雌激素活性。
采用ERs重组酵母模型检测20种植物醇提物的体外雌激素活性,其中虎杖、决明子、何首乌、淫羊藿、补骨脂有较强的雌激素活性,并确定其EC50和最大相对酶活力。以最大酶活力为指标进行雌激素活性排序,结果是补骨脂>何首乌>淫羊藿>虎杖>决明子;以EC50为指标进行雌激素活性排序,结果是虎杖>决明子>何首乌>淫羊藿>补骨脂。
采用ERs重组酵母模型检测制备的亚麻籽木脂素样品的雌激素活性,其中SDG聚合物未检出有体外雌激素活性,SDG聚合物的碱水解样品有弱的体外雌激素活性,分离纯化后的SDG样品(纯度为75.13﹪)具有较强的体外雌激素活性。