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本实验研究了胚胎及生后不同发育时期昆明小鼠脑的组织学发生以及β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)在其发育过程中的表达,试图探讨β-APP在脑发育过程中的正常生理功能。
方法:取胚胎7.5、9.5天小鼠全胚,胚胎11.5、13.5、15.5天胎鼠头部,胚胎17.5天、生后1天、生后7天、生后14天以及成熟昆明小鼠的脑组织进行石蜡包埋、连续冠状及矢状切片,并进行HE染色、尼氏染色以及Nestin,β-APP的免疫组织化学染色。
结果:(1)小鼠胚胎9.5天前神经管孔封闭,各脑泡结构分化开始明显,但尚未完全分化完成,胚胎11.5天已可分出明显五个脑泡,即端脑、间脑、中脑、后脑和末脑,之后各脑区按照不同的时空顺序发育成熟。(2)β-APP在胚胎7.5天即开始出现表达,但表达微弱;在胚胎11.5天脑泡壁可见明显点状表达;此后表达继续升高,胚胎13.5天在室管膜处表达很明显,胚胎17.5天在大脑皮质表达到高峰,海马和室管膜层也可见表达;生后β-APP表达普遍较低,直到成熟组较广泛表达。(3)Nestin在小鼠胚胎7.5天表达广泛,在胎盘和羊膜位置表达较强,神经板处表达较弱;在胚胎11.5~15.5天室管膜可见明显表达;至胚胎17.5天表达达到高峰,主要表达部位有室管膜,室管膜下层以及海马;出生后表达较弱;成熟组表达已接近阴性。
结论:(1)小鼠脑发育经历了复杂的变化过程,各脑区的发育呈不同时间空间变化,其发育过程大致可以分为四个阶段:①神经管形成阶段(E7.5~E9.5);②神经上皮.脑泡形成阶段(E9.5~E11.5);⑨神经元迁移分化阶段(E11.5~E17.5);④神经元成熟阶段(E17.5~成熟)。(2)β-APP在小鼠脑发育过程中有一定的生理作用,与神经元的增殖分化、神经元的迁移以及突触形成有关。