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香蕉(Musa)是热带、亚热带重要水果,是世界贸易的第一大水果。香蕉采后容易腐烂变质,造成严重的经济损失。炭疽病是香蕉采后的重要病害之一。利用热处理控制水果采后腐烂日益受到重视,但对热处理控制病害的机理尚未弄清。Ca2+作为第二信使在生物体内起着重要的作用。而Ca2+信号在热处理诱导抗病性中的作用,还未见报道。本研究以香蕉为材料,研究了热处理(hot water treatment,HWT)及其与CaCl2(简称Ca)、钙离子通道抑制剂LaCl3(简称La)、钙离子载体A23187(简称A)结合处理对采后香蕉抗病性的影响,旨在探讨钙在热处理诱导的抗病性中的作用及与活性氧、总酚含量和两个病程相关蛋白基因表达的关系,主要研究结果如下:
1、HWT、Ca处理及两者结合处理只能在贮藏前期保持香蕉较高的硬度,而HWT及结合各种钙效应剂处理却在12 d时不同程度降低了香蕉的转黄指数。HWT及结合各种钙效应剂处理均降低了香蕉的病情指数,以HWT+La处理效果最好。这些结果表明可以通过调节香蕉果实胞内Ca2+的浓度调节香蕉果实转黄和热处理对香蕉采后病害的控制效果,但并不影响采后香蕉后期的成熟进程。
2、与对照相比,HWT提高了香蕉果皮H2O2的含量,而HWT的H2O2含量低于HWT+La处理,高于HWT+A处理,说明细胞内Ca2+浓度变化可影响H2O2含量从而对抗病性起到调控作用。在24 h内HWT使采后香蕉果皮CAT活性迅速降低,而HWT+Ca与HWT差异不大,HWT+A和HWT+La处理CAT活性分别略高于和略低于HWT,这表明在贮藏前期,HWT及与钙效应剂结合处理可通过降低采后香蕉果皮CAT活性来增加H2O2含量,从而对香蕉抗病起到诱导作用。HWT同时也降低了POD活性,Ca、HWT+Ca处理在前期略提高了POD活性,这表明热处理同时也通过降低POD活性来增加H2O2的积累,而外源Ca2+可对此过程产生影响。
3、HWT的香蕉在前4 d NADPH氧化酶活性高于对照,Ca处理及HWT+Ca处理均提高了NADPH氧化酶的活性,以及O2·—产生速率。在所有处理中,HWT+La处理具有较高NADPH氧化酶活性和O2·—产生速率,这表明胞内Ca2+水平对活性氧产生起着调节作用。各处理的抗O2·—活力变化与O2·—的产生速率的变化趋势相一致,说明为了避免O2·—在细胞内过多积累而带来伤害,活性氧的水平是受到了严格而精确的控制。这些结果表明活性氧在热处理诱导采后香蕉抗病性中的作用是受Ca2+调控的。
4、HWT降低了香蕉果皮质膜Ca2+—ATPase和微粒体膜Ca2+—ATPase的活性,使较多的Ca2+在细胞质中积累成了可能。这与HWT后24 h香蕉果皮可溶性Ca2+含量升高的结果吻合。但HWT+Ca和HWT+A均提高了质膜Ca2+—ATPase和微粒体膜Ca2+—ATPase的活性,而降低了细胞质Ca2+—ATPase的活性,说明通过Ca2+—ATPase将胞质Ca2+转运到胞外而维持胞内Ca2+水平稳定的必要性。本研究表明热处理可能通过维持胞质较高Ca2+水平来诱导采后香蕉的抗病性。
5、与对照相比,HWT提高了香蕉总酚含量,HWT+A处理的总酚含量略高于而HWT+La处理略低于HWT。这表明保持胞内Ca2+浓度在合适水平有助于提高香蕉果皮总酚含量从而提高对病原菌的抵抗力。
6、HWT降低了香蕉整个贮藏期间MaChit基因的表达水平,降低贮藏前期MaPR1基因的表达水平,原因有可能与HWT抑制了乙烯生成有关。与HWT比较,HWT与CaCl2,A23187或LaCl3结合处理均增强了MaChit、MaPR1基因的表达,表明钙可在一定程度上恢复被HWT下调的MaChit、MaPR1基因表达。