干旱是影响植物生长发育最主要的非生物胁迫因子,培育耐旱农作物新品种是利用盐碱地最为经济、有效的措施。随着现代分子生物技术的飞速发展,通过基因工程技术改良农作物抗旱性的工作已取得了很大进展。　　 烟酰胺合酶基因(NAS)是一种植物生长代谢中的关键酶基因,对提高植物的抗旱性具有重要作用。甜菜碱醛脱氢酶(BADH)催化甜菜碱醛转化为甜菜碱,而甜菜碱是植物在盐、干旱或其它胁迫下在细胞中迅速积累的一种相容性有机小分子化合物,它在细胞中的积累与植物抗盐性的提高密切相关。　　 本文主要研究工作及其结果如下:　　 1.植物表达载体构建根据BADH基因和NAS基因序列,分别设计了一对引物进行PCR扩增,把BADH基因和NAS基因分别亚克隆到pMD-18T载体中,构建中间表达载体pUX12(含BADH)和pUX13(含NAS),序列测定验证基因正确性,用XbaⅠ把BADH基因从pUX12载体上切下,连接到载体pBI121上,构建成含:BADH基因表达载体pBIBB;用BamHI把NAS基因从pUX13载体上切下,连接到载体pOCA30上,构建成含NAS基因表达载体pOCA-N,并将其分别转化到根癌农杆菌LBA4404中。再用EcoRI和HindⅢ把35S P+NAS+Nos从载体pOCA-N上切下,设计引物进行PCR扩增,然后用ClaⅠ酶切,再连接到载体pBIBB,构建成含BADH基因和NAS基因的表达载体pBIBN,并将其转化到根癌农杆菌LBA4404中。　　 2.矮牵牛抗性植株的获得利用优化的转化参数,采用pBIBB(含有BADH基因),pOCA-N(含有NAS基因)和pBIBN(含有BADH和NAS双基因)三个表达载体,以相应的抗生素作为筛选剂,对矮牵牛进行遗传转化并获得了抗性植株,载体pBIBB共进行了1500个外植体的遗传转化,最后获得了89个仍保持绿色的抗性芽,平均转化率为5.93％;载体pOCA-N共进行了1600个外植体的遗传转化,最后获得76个抗性芽,平均转化率为4.75%;载体pBIBN共进行了1600个外植体的遗传转化,最后获得80个抗性芽,平均转化率为5.00%3.转基因植株的分子检测用BADH基因两端引物对89株pBIBB载体转化的抗性植株进行了PCR检测,共有61株扩增出1.5 kb的特异条带;对76株pOCA-N载体转化的抗性植株进行PCR检测,结果65株有1 kb的特异扩增带;对80株pBIBN载体转化的抗性植株进行PCR检测,结果57株有1.5 kb和1kb的特异扩增带。　　 选取扩增结果较好的片段进行PCR-Southern杂交,以未转化的矮牵牛植株为阴性对照,质粒pBIBB中BADH基因和质粒pOCA-N中NAS基因PCR扩增产物为阳性对照,质粒扩增的片段和部分转化植株的片段能够与由BADH和NAS制备的探针杂交,而阴性对照则无杂交信号。