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【目的】川崎病(Kawasaki disease,KD)又称皮肤粘膜淋巴结综合征(MucocutaneousLymphnode Syndrome,MCLS),是小儿时期的一种急性发热性血管炎,主要影响中小型动脉,特别是冠状动脉,虽然及时静脉注射丙种球蛋白(IntravenousImmunoglobulin,IVIG)可以缩短病程和减少冠状动脉病变(Coronary ArteryLesions,CAL)的发生率,仍约有10%的病人对注射IVIG没有反应,而这些病人有很高的CAL发生率。在许多国家KD已成为儿童最常见的获得性心脏病,也是成人CAL的病因之一。CAL的发生原因和机制至今未明,并且尚无早期判断IVIG耐药(Intravenous immunoglobulin non-responder,IVIG-NR)和CAL的实验室指标。循环内皮细胞(Circulating endothelial cells,CECs)及S100A12蛋白作为血管病变和炎症调节的指标,近年来引起国内外学者的高度关注。为了明确CECs和其表面S100A12蛋白与KD的关系,本研究采用单克隆抗体与流式细胞术(FlowCytometry,FCM)结合的手段进行检测和分析,评价KD病患者外周血循环内皮细胞与单个核细胞比值(Ratio of CECs to mono-nuclear cells,CECs/MNC)、循环内皮细胞上S100A12蛋白阳性率(Positive rate of S100A12 on CECs,CECs-S100A12/CECs)及循环内皮细胞上S100A12蛋白荧光强度(Flourescentintensity of S100A12 on CECs,FI-S100A12-CECs),探讨川崎病CAL可能的病理生理机制,并为KD临床治疗及预后判断提供依据。【材料与方法】1、病例与分组:1.1急性期川崎病组(Acute stage of Kawasaki Disease,A-KD)55人,男29例,女26例;年龄3~128月,平均34.00±25.80月,确诊后给予大剂量IVIG及阿斯匹林治疗。IVIG剂量:1g/kg/d,连续2天(起病10天内使用),其中IVIG-NR 5例,伴CAL者9例。1.2亚急性期川崎病组(Subacute stage of Kawasaki Disease,SA-KD)29人,男18例,女11例;年龄6-128月,平均35.55±31.99月,其中IVIG-NR者6例,伴CAL者9例。1.3恢复期川崎病组(Convalescent stage of Kawasaki Disease,C-KD)14人,男8例,女6例;年龄7-72月,平均33.29±23.62月,其中IVIG-NR者5例,伴CAL者6例。1.4正常对照组(Control)26人,均来自我院儿保门诊健康体检儿童,其中男13例,女13例;年龄4-85月,平均23.92±19.87月。2、FCM测定:采用单克隆抗体与FCM结合方法进行检测和分析,评价KD患者外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs。3、统计学处理:应用SPSS11.0统计软件,正态分布的资料组内行One-WayANOVE分析,组间行LSD检验;非正态分布的资料用Mann-Whitney Test检验;P<0.05为差异有显著性。正态分布资料采用均值士标准差(x±s)表示,非正态分布资料用中位数(2.5-97.5)%表示。【结果】1、KD外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs的变化:A-KD患者外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs均明显升高,分别为0.39(0.04-11.10)%、67.58±24.45%、214.00(9.99-2511.80)。正常对照组分别为0.24(0.05-1.10)%、39.35±19.58%、23.26(12.07-237.30);两组比较P值均<0,05。应用WIG后SA-KD患者外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs分别为0.16(0.01-1.00)%、65.99±22.40%、246.00(17.40-2613.00),与应用IVIG前A-KD比较,CECs/MNC明显下降(P=0.001)。C-KD患者CECs/MNC则基本恢复到正常水平0.24(0.06-1.70)%。但无论在SA-KD,还是在C-KD,CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs仍保持较高水平。2、IVIG-NR与IVIG敏感(IVIG responder,IVIG-R)KD患者外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs的变化:IVIG-NR-A-KD组外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs分别为0.38(0.13-6.25)%、69.34±26.81%、110.40(23.39-1622.00)。IVIG-R-A-KD组分别为0.40(0.04-11.48)%、67.41±24.49%、228.15(9.88-2669.95)。两组比较差异无显著性,P值均>0.05。IVIG-R-SA-KD外周血CECs/MNC为0.1 5(0.01-1.00)%,与IVIG-R-A-KD比较有明显下降(P<0.01)。IVIG-NR-SA-KD外周血CECs/MNC为0.29(0.11-0.65)%,与IVIG-NR-A-KD比较无明显下降。3、KD合并冠脉病变(KD-CAL)及冠脉正常组(KD-No-CAL)外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs的变化:A-KD-CAL组外周血CECs/MNC、CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs分别为0.36(0.07-0.70)%、62.50±26.37%、119.00(9.25-3105.00)。A-KD-No-CAL组分别为0.50(0.03-11.79)%、68.58±24.24%、264.50(10.76-1604.68)。两组比较差异无显著性,P值均>0.05。SA-KD-No-CAL组外周血CECs/MNC为0.1 5(0.01-1.00)%,与A-KD-No-CAL比较下降明显(P<0.01)。SA-KD-CAL组外周血CECs/MNC为0.21(0.08-0.83)%,与A-KD-CAL比较无明显下降。【结论】1.A-KD患者外周血CECs/MNC明显升高,提示A-KD患者血管内皮受炎症因子攻击,其血管内皮细胞脱落明显增加;在SA-KD CECs/MNC不下降或下降缓慢可作为IVIG-NR-KD及KD-CAL的指标之一。2.与A-KD相比,IVIG治疗后的SA-KD及C-KD,外周血CECs/MNC明显降低,提示WIG可能通过抑制炎症因子对血管内皮的攻击,减少血管内皮细胞脱落起到治疗和预防CAL的作用。3.外周血CECs-S100A12/CECs和FI-S100A12-CECs可作为A-KD临床辅助诊断指标之一。4.C-KD时CECs/MNC再度升高,高度提示KD-CAL可能。