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第一章，IFNγ、IFNγR、IL12、IL12R基因单核苷酸多态性与脊柱结核的相关性研究 目的:探讨IFNγ、IFNγR、IL12、IL12R基因单核苷酸多态性与脊柱结核易感性的关系。 方法:在2010年12月至2012年12月期间，纳入符合诊断标准的新发脊柱结核患者104例、正常人群106例，应用聚合酶链式反应(PCR)和DNA直接测序法检测两组人群基因多态位点:IFNG:rs2430561;IFNGR1: rs2234711、rs7749390、rs1327474; IL12B:rs3212227; IL12RB1: rs436857、rs393548的单核苷酸基因多态性，统计各等位基因和各基因型频率，分析各位点等位基因及基因型与脊柱结核易感性之间的关系。 结果:1.脊柱结核组中，IFNG rs2430561的A和T两种等位基因频率分别为29.8％、70.2％，脊柱结核组中AA，AT，TT基因型的分布频率分别为10.6％、38.5％、53％，与对照组比较，脊柱结核组等位基因频率(p=0.0242)和基因型分布(p=0.048)存在明显统计学差异，患者组等位基因A和基因型AA比例高于正常人组，表明此位点多态性与脊柱结核的发生相关，A等位基因(OR=1.67，CI=[1.067～2.611])及AA基因型(OR=4.566，95％CI=[1.211～17.210])是罹患脊柱结核的风险因素。2.脊柱结核组中，IFNGR1 rs2234711的C和T两种等位基因频率分别为62.5％、37.5％，CC，CT，TT基因型的分布频率分别为40.4％、44.2％、15.4％，与对照组相比较，rs2234711的等位基因频率(P=0.585)及基因型分布(P=0.799)不存在统计学差异，此位点多态性与脊柱结核的发生无关。3.脊柱结核组中，IFNGR1 rs7749390的T和C两种等位基因频率分别为40.9％、59.1％，脊柱结核组中的TT，CT，CC基因型的分布频率分别为18.3％、45.2％、36.5％，与对照组相比较，rs7749390的等位基因频率(P=0.872)及基因型分布(P=0.921)不存在统计学差异，此位点多态性与脊柱结核的发生无关。4.脊柱结核组中，IFNGR1 rs1327474的A和G两种等位基因频率分别为87.5％、12.5％，AA，AG，GG基因型的分布频率分别为75％、25％、0，与对照组相比较，rs1327474的等位基因频率(P=0.720)及基因型分布(P=0.367)不存在统计学差异，此位点多态性与脊柱结核的发生无关。5.脊柱结核组中，IL12Brs3212227的A和C两种等位基因频率分别为60.1％，39.9％，AA，AC，CC基因型的分布频率分别为34.6％、51％、14.4％，与对照组比较，rs3212227的等位基因频率(P=0.309)及基因型分布(P=0.479)不存在统计学差异，此位点多态性与脊柱结核的发生无关。6.脊柱结核组中，IL12BR1 rs436857的A和G两种等位基因频率分别为15.4％，84.6％，对照组中分别为0.75％，92.5％。脊柱结核组中的GG，AG，AA基因型的分布频率分别为72.1％、25％、2.9％，对照组中三种基因型的分布频率分别为84.9％，15.1％，0％。脊柱结核组等位基因频率(P=0.012)和基因型分布(P=0.035)与对照组相比存在明显统计学差异，患者组等位基因A和基因型AA比例高于正常人组，表明此多态位点与脊柱结核相关，携带等位基因A(OR=2.2272，95％CI=[1.182～4.197])是罹患脊柱结核的风险因素。7.脊柱结核组中，IL12BR1 rs393548的T和A两种等位基因频率分别为88.7％，11.3％，TT，AT，AA基因型的分布频率分别为78％、24％、2％，与对照组比较，两组对象间rs393548的等位基因频率(P=0.443)和基因型分布(P=0.557)不存在统计学差异，此位点多态性与脊柱结核的发生无关。8.IFNGR1 rs2234711 rs7749390 rs1327474三个多态位点经连锁不平衡检测表明:rs223711和rs7749390处在同一个连锁框内，可以进行单倍型分析。rs223711和rs7749390多态位点C-T单倍型是脊柱结核的风险因素(P＜0.005，OR=10.838，95％CI=[1.376～85.374])。IL12BR1 rs436857 rs393548两个多态位点经检测不存在连锁不平衡(D=0.854，r2=0.665)，不能进行单倍型分析。 结论: 1.IFNG rs2430561基因多态性与脊柱结核发病相关，A等位基因及AA基因型是脊柱结核的危险因素。 2.IL12RB1rs436857基因多态性与脊柱结核发病相关，A等位基因是脊柱结核的危险因素。 3.IFNGR1rs2234711,rs7749390,rs1327474,IL12Brs3212227,IL12RB1rs393548多态位点基因多态性与脊柱结核发病无关。 4.IFNGR1多态位点rs2234711和rs7749390 CT单倍型是脊柱结核的风险因素，携带CT单倍型的人群罹患脊柱结核的风险更高。 第二章，人血清干扰素γ与白细胞介素12表达水平及其影响因素与脊柱结核的相关性研究 目的:探讨血清IFNγ、 IL12浓度与脊柱结核的相关性，探讨血清IFNγ、IL12表达水平与其编码基因多态位点基因多态性的关系。 方法:在2010年12月至2012年12月期间，纳入符合诊断标准的新发脊柱结核患者104例、正常人群106例，应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测两组人群患者血清IFNγ、IL12浓度，结合已经测得的IFNG、IL12B基因型，探讨血清IFNγ、IL12浓度与脊柱结核之间的相关性以及血清IFNγ、IL12表达水平与其编码基因多态位点基因多态性的关系，分析单核苷酸基因多态性影响脊柱结核发生发展的机制。 结果:脊柱结核组患者血清IFN-γ平均浓度为28.19±8.27pg/ml，对照组血清IFN-γ平均浓度为39.54±10.14 pg/ml，差异有统计学意义(t=-8.89，P＜0.001);脊柱结核组患者血清IL12平均浓度为55.11±13.13 pg/ml，对照组血清IL12平均浓度为73.16±15.90 pg/ml，差异有统计学意义（t=-8.967，P＜0.001）。血清IFNγ、IL12浓度可以作为临床辅助诊断脊柱结核的血清学指标。IFNG rs2430561 AA基因型可引起血清IFNγ浓度降低;而IL12B rs3212227位点多态性与血清IL12浓度无明显相关性，IL12血清水平降低可能是其它因素造成的。 结论: 1.脊柱结核患者的血清IFN7、IL12浓度低于正常人。 2.IFNG rs2430561 AA基因型可引起血清IFNγ浓度降低;IL12Brs3212227位点多态性与血清IL12浓度无明显相关性。