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目的:经皮腔内冠状动脉介入治疗(PCI)已经成为冠心病治疗的一个重要手段,但术后6个月内30%-45%的再狭窄(RS)发生率严重影响了PCI的临床疗效。研究发现PCI术导致的血管内膜损伤可促进平滑肌细胞增殖、迁移,最终引起血管新生内膜形成及重塑而发生RS。有效抑制VSMC增殖,并尽快恢复内皮细胞(EC)活性及加速EC的修复,是防治RS的关键。昆明山海棠(THH)系卫茅科雷公藤属植物的一种,研究发现THH除了具有强力的抗免疫活性外,还具有抗炎、抗肿瘤、抗生育等药理作用。本研究应用THH中提取的主要活性成分TH-1来观察其对离体培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人血管平滑肌细胞(VSMC)的影响,以探讨其在防治RS中的可能机制。方法:无菌培养人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞,选择生长良好的第4-10代人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞用于实验。台盼蓝(trypan blue)排斥实验检测TH-1对HUVEC成活率的影响。改良MTT法观察TH-1对正常HUVEC及VSMC增殖的影响。流式细胞术检测TH-1对HUVEC及VSMC周期分布情况。TUNEL/PI双染法检测TH-1对VSMC凋亡变化情况。结果:5-200μg/mL的TH-1与VSMC共同孵育24,48,72,96小时后,MTT比色分析结果显示VSMC吸光度降低,且呈一定程度的浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测示用药后低剂量TH-1组(25μg/m1)使VSMC有丝分裂被阻断于Go/G1期,高剂量组(100μg/m1)用药后VSMC有丝分裂被阻断于G0/G1期及G2/M期,并通过TUNEL/PI双染法发现TH-1有诱导VSMC凋亡的作用。1-200μg/ml的TH-1与HUVEC共同孵育24,48,72,96小时后,发现TH-1能使HUVEC存活率降低;MTT比色分析结果显示VSMC吸光度降低,且呈一定程度的浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测示用药后TH-1使HUVEC的G0/G1期细胞百分数明显增加。结论:TH-1主要通过诱导凋亡作用抑制VSMC增殖,对于抑制支架植入后新生内膜形成有潜在的临床应用价值,但其对血管内皮细胞亦有非选择性的抑制作用,其机理可能与其抑制HUVEC细胞周期的G1/G0期向S期过渡,使之停滞于细胞周期的G1/G0期有关。