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本文通过建立的动物模型,探讨了内毒素人工诱发乳腺炎时,动物乳腺局部及整个机体免疫功能的变化;并通过分别给动物应用谷氨酰胺和黄芪多糖,探索其在动物发生实验性乳腺炎时,对乳腺局部免疫和机体免疫功能的影响;本实验还在奶牛上人工诱发了实验性乳腺炎,初步探讨了奶牛乳腺炎发病过程中的免疫机理和黄芪多糖对乳腺的保护作用。 1.乳房内灌注内毒素诱发大鼠实验性乳腺炎模型的建立 20只SD受孕大鼠随机分成正常对照组(n=5)和实验组(n=15),产后72h分别用灭菌生理盐水(physiological saline solution,PSS)和不同剂量(5μg、10μg、50μg)的大肠杆菌内毒素经乳头管灌注到大鼠第四对乳腺内(各剂量5只),灌注后24h处死大鼠,取乳腺组织固定,进行组织学观察,测定了血清及乳腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、分泌型IgA(sIgA)的含量及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)的活力变化。组织病理学观察显示:灌注5μg和10μg内毒素组的大鼠乳腺组织结构不清,但仍可辨认,腺泡腔内出现中性粒白细胞(PMN);灌注50μg内毒素组的大鼠乳腺组织破坏得更为严重,乳腺组织结构消失,乳腺为大量密集的PMN浸润。与对照组相比,灌注50μg内毒素组的大鼠乳腺组织中TNF-α、sIgA含量及NAGase活力显著升高(P<0.05);血清中sIgA含量显著高于正常对照组(P<0.05)。实验各组大鼠血清中TNF-α含量无显著变化(P>0.05),而NAGase活力显著低于正常对照组(P<0.05)。组织学观察及生化指标测定结果表明,乳头管灌注内毒素诱发大鼠实验型乳腺炎动物模型成功建立。 2.谷氨酰胺对内毒素诱发大鼠实验性乳腺炎的影响 35只SD受孕大鼠随机分成正常对照组(Con,n=5)、阳性对照组(P,n=15)和实验组(T,n=15)。阳性对照组与实验组内分为3个剂量组,分别为P1、P2、P3、T1、T2和T3组。实验组大鼠每天按0.34mmol·kg-1。灌喂谷氨酰胺(glutamine,Gln),直至实验结束,而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水(PSS)。孕鼠于产后72h,分别用灭菌PSS和不同剂量(5μg、10μg、50μg)的大肠杆菌内毒素经乳头管灌注到大鼠第四时乳腺内。灌注后24h处死大鼠,取乳腺组织固定,进行组织学观察。观察显示3