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我国是石油进口大国,近年来石油需求量日益上升,因此带动海上石油运输业蓬勃发展,然而船舶泄露和钻井平台爆炸等溢油事故发生频率和规模也呈上升趋势,这严重影响了海洋生态环境的稳态。为了定量化评估油污染对海洋渔业及海洋生态环境损害的程度,开展油污染对海洋生物的急性毒性研究,提供可靠的数据势在必行。本实验研究了 180#燃料油及3种消油剂对发光细菌的单一和复合急性毒性效应,即实验组180#燃料油分散液(WAF);180#燃料油分别与微普消油剂、白灵919消油剂、GM-2型消油剂组成的乳化液(BEWAF、CEWAF1、CEWAF2)以及空白组(B)三种消油剂对照组(DB、DC1、DC2)。对180#燃料油分散液和乳化液还进行了15min内每分钟的发光量测定以及30min、45min、60min时发光量测定,数据整理后绘制每个实验组时间-效应散点图、15min浓度-效应散点图并用Origin 8.0进行非线性拟合最终求出EC50,进而判断各实验组的毒性强弱。用Matlab软件建立浓度-时间-效应三维曲面图并进行模型拟合。根据实验数据可以看出,180#燃料油分散液(WAF)和乳化液(BEWAF、CEWAF1、CEWAF2)组中,发光抑制率随着时间变化不明显,浓度较低时发光抑制率基本保持不变。各组随着浓度的升高,8min左右出现抑制率上升趋势,此趋势分别出现在5.578mg/L、5.578 mg/L、2.656 mg/L、1.897 mg/L时,且WAF、BEWAF、CEWAF1、CEWAF2的15min-EC50 分别为 6.513mg/L、4.890 mg/L、3.991 mg/L、2.806 mg/L。这些数据可以说明BEWAF毒性与CEWAF1、CEWAF2相比最小,即三种消油剂的毒性大小为微普消油剂<白灵919消油剂<GM-2型消油剂。而三组消油剂对照组的抑制率与空白组差异很小,但也略显现上述规律,说明消油剂本身毒性很小甚至无毒。浓度-时间-效应曲面图便能直观反映出抑制率与受试液浓度和时间的三维变化关系。同样,毒性效应随着时间变化趋势不明显而随着浓度变化较明显,各实验组均呈现浓度越高抑制率越高的趋势,而随着时间变化幅度较小,8min左右出现小幅上升趋势。应用发光细菌测试对污染物进行毒性分析已经成为当前研究的热点。发光细菌是海洋中普遍存在的一种低等生物,以其作为生物毒性指标对污染物毒性评价具有重要意义。尤其针对于石油毒性研究应用较少,本实验方法可以为其他石油类产品毒性研究提供参考借鉴价值,开辟了利用发光细菌检测溢油毒性的新方向。研究结果中的数据和拟合模型可作为溢油污染风险评估的参考依据和数据支持。