甘草叶化学成分的分离鉴定、定量分析及生物活性研究

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:bashi0000
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甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch),豆科、甘草属多年生草本植物。中国药典将乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Bat)和光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)作为药用甘草植物收录。传统甘草的入药部位是根和根茎,而地上部分大多被浪费。为了从甘草叶中分离更多尚未发现的化学成分,寻找更多的高活性成分,更好的利用甘草地上部分,本论文对乌拉尔甘草叶提取物大孔树脂80%乙醇洗脱部分的成分进行分离纯化和结构鉴定,对甘草不同部位及不同采集月份甘草叶有效成分含量进行了分析,并进一步对分离得到的纯品化合物进行了清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶及麦芽糖酶生物活性研究。采用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20、Prep-HPLC等色谱方法分离纯化甘草叶中化学成分,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。从甘草叶乙醇提取物的大孔树脂80%乙醇洗脱物中分离得到15个化合物,其中三个新的异戊烯基二氢茋类化合物分别命名为甘草吡喃茋A(glycypytilbene A,1),甘草二吡喃茋(glycydipytilben,2),甘草吡喃茋B(glycypytilbene B,3);其它化合物为已知物,分别鉴定为α,α’-二氢-3,5,4’-三羟基-4,5’-二异戊烯基茋(α,α’-dihydro-3,5,4’-trihydroxy-4,5’-diisopentenylstilbene,4),α,α’-二氢-3,5,3’,4’-四羟基-2,5’-二异戊烯基茋(α,α’-dihydro-3,5,3’,4’-tetrahydroxy-2,5’-Diisopentenylstilbene,5),6-异戊烯基圣草酚(6-prenyleriodictyol,6),5’-异戊烯基圣草酚(5’-prenyleriodictyol,7),6-异戊烯基槲皮素-3-甲醚(6-prenylquercetin-3-Me ether,8),5’-异戊烯基槲皮素(5’-prenylquercetin,9),6-异戊烯基槲皮素(6-prenylquercetin,10),6-异戊烯基柚皮(6-prenylnaringenin,11),3’-异戊烯基柚皮素(3’-prenylnaringenin,12),(sigmoidin C,13),8-[(Z)-3-羟甲基-2-丁烯基]-圣草酚(8-[(Z)-3-hydroxymethyl-2-butenyl]-eriodictyol,14),槲皮素-3-甲醚(quercetin-3-Me ether,15),所分离得到的化合物包括,二氢茋类化合物5个(1-5),二氢黄酮类化合物6个(6、7、11-14),黄酮醇类化合物4个(8-10、15)。其中化合物1-3为新化合物。高效液相-质谱(UPLC-MS/MS)定量分析甘草各部位(根、根茎过渡区、茎、叶、种子、种荚)及鄂尔多斯甘草叶丰产时期6-10月份采集的甘草叶有效成分的含量。显示被定量的从甘草叶中分离纯化得到的15种化合物及相关8种化合物大多特异性分布于甘草叶和种荚中。化合物1、3、5、7、8、13、15、16(木樨草素luteolin)、17(槲皮素,quercetin)、18(圣草酚,eriodictyol)在甘草叶中的含量从6月到10月整体呈下降趋势,6月份含量最高,化合物4、6、9、11、21(3,3’,4’,5,7-五羟基二氢黄酮,3,3’,4’,5,7-pentahydroxyflavanone)在甘草叶中的含量从6月到10月整体呈上升趋势,10月份含量最高。化合物10和14在7月份采集的甘草叶中含量最高,化合物2和12在8月份采集的甘草叶中含量最高,化合物19(芦丁,rutin)和20(异槲皮苷,isoquercitrin)在9月份采集的甘草叶中含量最高。对甘草叶中分离纯化得到的15种化合物及本研究室前期得到8种化合物做了抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制活性及麦芽糖酶抑制活性实验。实验结果显示,化合物(1、5-11、14-15)具有较强的抗氧化活性,化合物(2-11、15、17、21)均具有抑制α-葡萄糖苷酶活性,化合物(5、7、9、10、14、15)具有一定的抑制麦芽糖酶活性。
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