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草菇起源于中国,迄今已有300多年的栽培历史。草菇是热带和亚热带的一种主要栽培食用真菌,如同大多数热带和亚热带作物一样,零上低温条件(10℃以下)会造成草菇菌丝生理损伤而发生菌丝自溶导致草菇的死亡。这给草菇的生产带来了极大的困难,也制约了草菇生产在中国甚至世界上的发展,本文从草菇低温诱导基因方面着手采用mRNA差别筛选技术比较新鲜和在低温处理草菇的基因表达,在选用的32个随机引物进行PCR扩增中,有19个引物扩增出mRNA的差异条带,从琼脂糖凝胶中直接切割特异条带,经PCR再次扩张放大,琼脂糖凝胶电泳纯化,共分离并纯化63个mRNA低温特异片段。采用PCR掺入法合成地高辛标记的cDNA探针,根据cDNA-DNA杂交所显示的结果,证明mRNA显示技术所分离的基因片段中有12具有温特异性。将此12个片段标记为地高辛探针,与草菇基因组DNA片段进行Southern杂交,杂交的结果表明经低温诱导产生的冷激基因在草菇基因组中为低拷贝数存在。为获得草菇低温诱导基因的全长序列,本研究构建了草菇cDNA文库,并以已获得的低温诱导基因片段为探针对cDNA文库进行筛选。