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口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白3A基因的突变(点突变或缺失)和3B基因的拷贝数与病毒的宿主嗜性有关,但FMDV宿主偏嗜性的分子机制目前还不明了。本研究选取口蹄疫Mya-98谱系牛源分离株O/GZSB/2011和猪源分离株O/GD/2/CHN/2010,进行了全基因组测序和全长感染性cDNA克隆的构建,并在此基础上构建了3A缺失突变体(rvSBA93-102、rvSBΔ133-143、rvGDA93-102和rvGDA133-143)3A嵌合病毒(rvSB70、rvOZ70和rvSBqO)、3A标记病毒(rvSBm、rvSBh和vSBf)和3B突变体病毒(rvB1323、rv2B3、rvB13和rv1B3),分析了这些重组病毒在不同宿主细胞上的生物学特性,结果表明：1、4株3A缺失突变体在BHK-21、PK-15和胎猪肾原代细胞(FPK)上具有与亲本毒株相似的蚀斑表型和生长动力学；在胎牛肾原代细胞(FBK)上,rvSBA133-143和rvGDA133-143具有与其亲本毒株相似的蚀斑表型和生长动力学,而rvSBA93-102和vGDA93-102能够复制,但是展示较小的蚀斑表型和较低的复制能力。因此,3A蛋白上的93-102位氨基酸残基的缺失显著影响病毒在FBK上复制能力,说明他是影响宿主嗜性的主要因素之一；然而,该位点缺失并不能完全消除病毒在FBK细胞上的复制能力,说明除3A蛋白93-102位氨基酸外,FMDV基因组中的其他序列也影响FMDV的宿主嗜性。2、3A嵌合病毒及其亲本病毒在BHK-21和FPK细胞上具有相似的蚀斑表型和生长动力学;而rvSBqO和rvSB70与其亲本毒株相比,在FBK细胞上呈现较小的噬斑表型和较低的生长速率,rvOZ70和O/HN/CHA/93在FBK细胞上不能形成可见的蚀斑。据此得出：3A蛋白上93-102位氨基酸两侧的序列也影响FMDV的宿主嗜性；在FMDV基因组中,3A蛋白以外的其他序列也影响FMDV的宿主嗜性。3、标签蛋白可在3A标记病毒的传代中稳定遗传和表达,并且3A标记病毒与亲本病毒在BHK-21细胞上具有相似的蚀斑表型和生长动力学；而3A标记病毒在FBK细胞上呈现比其亲本毒株较小的噬斑表型和较低的生长速率,然而3个3A标记病毒在FBK细胞上展示相似的蚀斑表型和生长动力学。此结果说明,FMDV 3A蛋白上93-102位氨基酸的替换影响FMDV在FBK细胞上生长速率,并且3A蛋白上影响FMDV宿主嗜性的93-102位氨基酸残基可缩短为94-101位氨基酸残基。4、3B突变体病毒rv2B3、rvB13和rvB1323在BHK-21和FBK具有与亲本毒株相似的蚀斑表型和生长动力学,而含1个拷贝的rv1B3病毒在BHK-21和FBK细胞上则展示较小的蚀斑表型和较低的复制速率。在同等剂量接种条件下,3B突变体病毒在BHK-21细胞上的病毒滴度与其各自在FBK细胞上的病毒滴度相似,但3B突变体病毒在BHK-21和FBK细胞上的病毒滴度从高到低的顺序都为rvGZSB>rvB 1323>rv2B3>rvB 13>rv1B3。因此,在FMDV中,3B蛋白拷贝数也影响FMDV的复制效率,但不影响FMDV的宿主嗜性。上述研究结果,为进一步研究FMDV的基因功能、宿主嗜性及致病机制奠定了基础。