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目的:通过构建SD大鼠MCAO模型,由此观察右美托咪定对大鼠一过性局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信号通路在右美托咪定对大鼠缺血再灌注脑损伤保护中的作用及相关机制。同时观察PI3K/AKT信号通路对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用,为临床上围术期脑缺血再灌注损伤的预防和治疗提供新的靶点及理论依据。第一部分的研究采用不同剂量右美托咪定对SD大鼠脑缺血再灌注模型进行预处理,观察右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,并探讨相当于临床常用剂量的右美托咪定对围术期脑缺血再灌注损伤是否具有保护性作用。第二部分研究PI3K/AKT信号通路与Wnt/β-catenin信号通路在右美托咪定对大鼠缺血再灌注脑损伤保护中的作用,并观察PI3K/AKT信号通路对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。第三部分研究右美托咪定对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响并探讨PI3K/AKT信号通路与Wnt/β-catenin信号通路在该过程中的作用。研究方法:1、通过MCAO方法构建大鼠一过性局灶性脑缺血再灌注模型;2、应用Longa评分法对大鼠的神经功能缺损进行评分;3、采用TTC染色对大鼠脑片进行染色以显示大鼠脑梗面积;4、采用尼氏染色对大鼠脑石蜡切片染色,显微镜下观察细胞形态并判断神经元存活情况;5、采用Western Blot方法检测大鼠脑缺血半暗带区域通路相关关键蛋白与凋亡相关蛋白的表达水平;6、采用qRT-PCR的方法检测凋亡相关基因的表达水平。结果:1、中剂量组右美托咪定可对大鼠脑缺血再灌注损伤产生显著的保护作用,大鼠的Longa评分、梗死面积及神经元存活情况与I/R组相比均有显著改善(P<0.05);高剂量组、低剂量组与I/R组相比,大鼠的Longa评分、梗死面积以及神经元存活率均无统计学意义(P>0.05)。2、在应用右美托咪定对MCAO大鼠进行预处理干预(Dex+I/R组)后,大鼠的Longa评分、梗死面积及神经元存活情况与I/R组相比均有显著改善(P<0.05),同时pAKT、pGSK3β、β-catenin蛋白表达与I/R组相比显著增高;在加用PI3K抑制剂LY294002(LY+Dex+I/R组)后右美托咪定引起的pAKT、pGSK3β、β-catenin的表达增高被抑制(P<0.05),同时大鼠的Longa评分、梗死面积及神经元存活情况的改善也被明显抑制(P<0.05),与I/R组相比无统计学差异(P>0.05);在加用β-catenin转录抑制剂XAV939(XAV+Dex+I/R组)后,pAKT、pGSK3β与胞浆内β-catenin的表达增高较右美托咪定预处理的I/R组无显著变化(P>0.05),但细胞核内β-catenin的表达较右美托咪定预处理组(Dex+I/R组)显著降低(P<0.05),同时右美托咪定预处理所带来的保护作用也被明显抑制(P<0.05);在单纯应用GSK3β抑制剂SB-216763处理的I/R组(SB+I/R组),大鼠的Longa评分、梗死面积及神经元存活情况与I/R组相比也有显著改善,且伴有pGSK3β、β-catenin的表达与I/R组相比明显增高(P<0.01);而pAKT的表达较I/R组无显著变化(P>0.05)。3、在应用右美托咪定对I/R大鼠进行干预(Dex+I/R组)后,cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白表达及Bax基因表达均明显减少(P<0.01),Bcl-2蛋白及基因表达明显增加;而在加用LY294002(LY+Dex+I/R组)后,这种表达变化被抵消,cleaved caspase3蛋白表达与Bax、Bcl-2基因表达与I/R组相比,无明显差异(P>0.05);但在加用XAV939(XAV+Dex+I/R组)后,右美托咪定引起的cleaved caspase3蛋白表达与Bax、Bcl-2蛋白及基因表达变化并未受到明显影响(P>0.05);与I/R组相比,在应用SB216763处理I/R大鼠(SB+I/R组)后也表现出cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白表达与Bax基因表达明显减少,Bcl-2蛋白与基因表达明显增加。结论:1、中等剂量右美托咪定可对大鼠脑缺血再灌注损伤产生显著的保护作用。2、PI3K/AKT信号通路与Wnt/β-catenin信号通路均参与右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用;且Wnt/β-catenin信号通路位于PI3K/AKT信号通路下游,并接受PI3K/AKT信号通路的调控。3、Wnt/β-catenin信号通路的激活对大鼠脑缺血再灌注损伤具有重要保护作用。4、在右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用中,PI3K/AKT信号通路能够通过抑制凋亡参与保护过程,但其通过激活Wnt/β-catenin信号通路所产生的保护性作用与调节凋亡关系不大。5、GSK3β抑制剂对缺血再灌注大鼠具有脑保护作用,抗凋亡作用可能是其机制之一,激活Wnt/β-catenin通路所产生的保护作用可能为其机制之二。