胆汁淤积在慢性肝病中的发病率大约为35%,且随着年龄增长有上升的趋势,持续性的胆汁淤积,可发展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌,给患者带来严重的经济负担。临床研究发现,重用赤芍在淤胆型肝炎治疗中疗效显著,显著缓解患者血清肝功能指标异常和肝组织病变程度,改善患者的生活质量。课题组前期研究表明赤芍主要活性成分芍药苷（Paeoniflorin,PF）可显著改善胆汁淤积大鼠血清生化指标、肝细胞损伤、炎性细胞浸润,然而,PF在治疗胆汁淤积性肝损伤的机制尚未被完全揭示。因此,本研究通过网络药理学、代谢组学等高通量生物信息学方法结合常规分子生物学技术,探讨PF治疗胆汁淤积性肝损伤的作用机制。通过考察PF对α-萘酰异硫氰酸酯（Alpha-naphthylisothiocyanate,ANIT）诱导的胆汁淤积性肝损伤大鼠血清肝功能指标丙氨酸转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素（Total bilirubin,TBIL）、总胆汁酸（Total bile acid,TBA）、碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT）、白蛋白（Albumin,ALB）和肝组织病变的影响,明确PF对胆汁淤积性肝损伤的治疗作用;通过RT-PCR、Western blotting和免疫组化等分子生物学技术,检测PF对大鼠肝组织沉默调节蛋白1（Sirtuin 1,SIRT1）/法尼醇X受体（Farnesoid X receptor,FXR）、核因子E2相关因子2（Nuclear factor erythroid2-related factor2,Nrf2）和核因子κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）/NLRP3炎症小体信号通路及炎症因子的表达影响;采用非靶向代谢组学,明确PF治疗胆汁淤积性肝损伤的粪便和尿液生物标志物及其代谢通路,进一步结合网络药理学方法,构建“生物标志物-靶点-PF”的交互网络,明确PF调控生物标志物的上游靶点,系统揭示PF对胆汁淤积性肝损伤的作用机制。结果显示,PF各剂量组可不同程度地降低大鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA、γ-GT水平,升高ALB水平（P＜0.05,P＜0.01）。肝组织病理检测显示,PF各剂量组可不同程度地缓解肝组织中炎性细胞浸润、肝细胞坏死等病理改变程度。分子生物学方法检测结果显示,PF可显著降低肝组织NLRP3、Caspase-1、ASC、TNF-α、IL-1β和IL-18等m RNA表达水平（P＜0.05,P＜0.01）,显著增加肝组织SIRT1、FXR、Nrf2蛋白的表达水平,降低NF-κB p65、NLRP3等蛋白表达水平（P＜0.05,P＜0.01）。粪便非靶向代谢组学结果显示,PF可显著改变粪便中墨蝶呤、牛磺去氧胆酸、同香草酸、L-苯丙氨酸、亚油酸、磷酸肌酸等13种生物标志物表达水平。进一步对粪便生物标志物进行通路富集分析,得到芍药苷调控的亚油酸代谢、苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸生物合成等16条代谢通路。通过构建“粪便生物标志物-靶点-PF”网络,发现PF可通过调节CDC25B、CYP2C9、MAOB、MTOR和ABCB1调控粪便生物标志物亚油酸、N-去甲基西酞普兰、3-甲氧基酪胺、墨蝶呤和PE[15:0/18:4（6Z,9Z,12Z,15Z）]的表达。尿液非靶向代谢组学研究显示,PF可显著改变尿液中三磷酸硫胺素、一磷酸硫胺素、羧磷酰胺等6种尿液生物标志物表达水平,进一步对尿液生物标志物进行通路富集分析,得到PF调控的硫胺素代谢、硫代谢、维生素B6代谢等6条代谢通路。通过构建“尿液生物标志物-靶点-PF”网络,发现PF可通过GSTP1和CDK2两个靶点调控尿液生物标志物硫酸盐的改变。本研究确证了PF对胆汁淤积性肝损伤大鼠的治疗作用,发现了PF可通过激活SIRT1/FXR信号通路和抑制NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路改善胆汁淤积性肝损伤,明确了PF治疗胆汁淤积性肝损伤粪便及尿液代谢特征,系统揭示了PF治疗胆汁淤积性肝损伤的作用机制。