【摘 要】
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目的：研究USPIO标记anti-VEGFR-2抗体的探针的生物学性质与体外MR成像能力,为基于MRI技术的VEGF/VEGFRs体内分子成像提供理论基础。方法：体外培养高表达VEGFR的小鼠胰岛内皮细
【出 处】
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北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的：研究USPIO标记anti-VEGFR-2抗体的探针的生物学性质与体外MR成像能力,为基于MRI技术的VEGF/VEGFRs体内分子成像提供理论基础。方法：体外培养高表达VEGFR的小鼠胰岛内皮细胞。采用化学耦联法合成USPIO标记的anti-VEGFR-2抗体的特异性探针,用单纯USPIO纳米颗粒作为对照组。然后进行：(1)DLS法质控探针质量：将探针制成悬液,用DLS法检测探针合成情况；(2)探针的细胞毒性试验(MTT试验)：选取两组细胞,分别加入不同浓度的探针悬液与USPIO悬液,孵育4h后,采用MTT法测定两组细胞的OD值；(3)探针的体外结合能力：选取两组细胞,分别加入不同浓度的探针悬液与USPIO悬液,孵育4h后,进行普鲁士蓝染色成像；(4)探针的体外MR成像能力：取2皿处于对数生长期的MSl细胞,分别加入相同浓度的探针悬液与USPIO悬液,孵育4h后,在西门子1.5T MRI机上进行FSE T2WI扫描,观察其MR成像能力；(5)探针弛豫率的测量：采用多回波SE-T2WI扫描呈浓度梯度的不同浓度探针悬液,用线性回归方程计算探针弛豫率。结果：(1)通过DLS法证实特异性抗体(anti-VEGFR-2)可成功结合到USPIO颗粒上；(2)MTT实验表明探针在10-120ug/ml的浓度范围内对细胞无毒性；(3)普鲁士蓝结果证明,特异性探针具有高效结合MS1细胞的能力,且随探针浓度增加,细胞结合探针的量也增加；(4)利用西门子1.5T磁共振仪,通过对实验组及对照组细胞悬液进行MRI T2WI成像,观察到实验组较对照组表现出T2WI信号的明显衰减,表明特异性探针具备良好的MR成像能力；(5)探针与USPIO弛豫率之间不存在差异,表明USPIO表面结合的抗体不会影响USPIO本身的弛豫特征。结论：USPIO标记的anti-VEGFR-2抗体探针具有良好的生物学特性与体外MR成像能力。
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