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小檗碱(Berberine, BR),亦称黄连素,是一种重要的异喹啉生物碱。它是一种平面结构的药物,具有潜在抗癌功效,对其进行简单、灵敏的测定具有重要的临床医学意义。小檗碱的水溶液几乎不具有荧光,所以不能用常规荧光法直接测定小檗碱。本研究表明可以通过改善小檗碱的介质微环境,增强小檗碱的荧光,从而建立了测定小檗碱的荧光分析新方法,具体工作如下:一、以离子液体[Bmim][BF4]为微介质荧光法测定小檗碱离子液体(Ionic Liquid, IL)是指在室温或接近室温下呈现液态,完全由阴、阳离子所组成的低温熔融盐。与传统有机溶剂相比,离子液体具有不挥发、不可燃、导电性强、粘度很大、熔点低,溶解性好等优点。本研究发现将一定浓度的离子液体[Bmim][BF4]加入到小檗碱溶液时,小檗碱的荧光显著增强。据此现象,建立了一种简单测定小檗碱的新分析方法。详细考察了实验条件对此体系荧光强度的影响。在优化的实验条件下,小檗碱的浓度在1.0×10-6-1.0×10-4g/mL范围内与体系的荧光强度呈良好的线性关系(相关系数是0.9924,n=12)。本法检出限为0.13μg/mL。将此方法用于实际样品复方黄连素片中的小檗碱含量进行检测,结果令人满意。二、以G-四聚体DNA为微介质荧光法测定小檗碱G-四聚体DNA是指富含鸟嘌呤(G)的单链DNA在某些配体的诱导下通过G碱基间Hoogsteen氢键形成G-四链体,G-四链体进一步通过非共价的π-π堆积结合成的DNA分子的二级结构。本研究表明在钾离子存在下,小檗碱可以诱导富G单链DNA (G-rich DNA,5’-GGTTGGTGTGGTTGG-3’)形成G-四聚体结构,此小檗碱-G-四聚体复合体具有很强的荧光。据此现象,建立了一种简单测定小檗碱的新分析方法。通过紫外-可见光谱、荧光光谱、圆二色光谱等手段,研究此体系荧光机理。在优化的实验条件下,小檗碱的浓度在1.0×10-8-1.0×10-5g/mL范围内与体系的荧光强度呈良好的线性关系(相关系数是0.9950,n=14)。本法检出限为1.2ng/mL。本法具有操作简单、灵敏度高、选择性高、线性范围宽等优点。