长非编码RNA(lncRNA)是转录本长度大于200核苷酸不编码蛋白质的RNA。本研究基于本实验室前期基因芯片结果,筛选出在肌肉组织中高表达的lncRNA-AK004418,以小鼠C2C12细胞为研究材料,利用RNA干涉和超表达技术研究了lncRNA-AK004418对成肌细胞增殖和分化的影响。主要的研究结果如下:1.利用RACE技术获得了AK004418的全长序列,该lnc RNA位于编码基因SYNPO2第4内含子区域,且无蛋白编码能力;AK004418在腿肌、背最长肌和舌中高表达,而SYNPO2在所研究的13种组织中均有表达;在成肌细胞分化过程中,AK004418表达量逐渐上升,而SYNPO2在细胞分化5天表达量最高;核质定位结果表明AK004418分布在细胞核和细胞质中。2.利用实时定量PCR、Western Blot、RTCA xCELLigence系统和细胞免疫荧光技术在成肌细胞中研究了干涉和超表达AK004418后对SYNPO2基因表达、成肌细胞增殖与分化的影响。研究结果表明AK004418促进了成肌细胞增殖,抑制了成肌细胞分化及其标志基因MyHC和MyoG的表达,但对SYNPO2基因表达无显著影响。3.利用基因芯片技术检测了AK004418干涉前后的基因表达变化,结果表明干涉AK004418后上调差异表达的基因有1357个,下调差异表达的基因有1837个,上调差异表达基因主要与心肌疾病等信号通路相关,下调差异表达基因主要与细胞周期、机动蛋白细胞骨架调节等通路相关。利用实时定量PCR对其中的21个基因进行了验证,其中18个与芯片结果一致。本研究结果为进一步研究成肌细胞增殖和分化过程中lnc RNA-AK004418的作用机制奠定了基础。