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糖尿病肾病(Diabtic Nephropathy,DN)是糖尿病主要的微血管并发症,最终可导致终末期肾功能衰竭,是糖尿病患者致死致残的重要原因之一。探索DN发病机制,及时有效的控制DN的发生与进展是当前临床研究面临的一个重要问题。DN的主要病理表现是肾小球毛细血管基底膜增厚,系膜细胞增生,进而造成肾小球结节性硬化,病理机制非常复杂,包括了肾脏血流动力学改变、蛋白非酶糖基化,氧化应激反应及内皮细胞损伤等,是多因素,多条通路协同作用的结果。目前对DN尚无特异性的药物,中医药的辨证论治及个性化的用药方案在DN显示出一定的优势,有很好的开发前景。据研究表明,麦冬多糖、黄连生物碱、三七总皂苷单药及复方制剂可以降低血糖,改善胰岛素抵抗,改善糖尿病血管并发症,本实验是根据导师多年的临床经验和前期课题对冬连胶囊的研究成果为依据,通过应用中药组分(黄连生物碱40%、三七总皂苷35%、麦冬多糖25%比例配伍)对糖尿病肾病大鼠肾小球滤过功能、血管活性物质、肾组织糖化蛋白和Na+-K+-ATP酶的影响,在细胞水平上探讨中药组分对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用机制,为探求中药组分复方制剂治疗糖尿病肾病提供理论依据。目的：观察中药组分(黄连生物碱40%、三七总皂苷35%、麦冬多糖25%)对链脲佐菌素制备的糖尿病肾病模型大鼠肾小球滤过功能,血管活性物质,肾组织糖化蛋白和Na+K+-ATP酶的影响,探讨中药组分对糖尿病肾病大鼠肾功能保护作用的机制,为探求中药组分复方制剂治疗糖尿病肾病提供理论依据。方法：8周龄(190～210g体重)SPF级SD种系雄性大鼠65只,适应性喂养1周后,随机取出10只作为空白对照组,其余进行糖尿病模型造模。链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射,注射剂量为55mg/Kg,1周后检查尾静脉空腹血糖,血糖水平超过11.1mmol/L造模成功,剔除血糖不达标大鼠,其余大鼠随机分为5组。分别为：1、高剂量中药组分(Ⅰ)组,2、中剂量中药组分(Ⅱ)组,3、低剂量中药组分(Ⅲ)组,4、二甲双胍(阳性对照药)组,5、糖尿病对照组(模型对照组)。高、中、低剂量组大鼠每天灌胃中药组分分别为0.45g/kg、0.15g/kg、 0.05g/kg;二甲双胍组大鼠每天灌胃二甲双胍0.05mg/kg;糖尿病对照组大鼠每天同样体积生理盐水灌胃,灌胃体积各组均为1ml/kg。连续灌胃4周后,采用断头采血,留取双肾标本。采用葡萄糖氧化酶法检测血浆中空腹血糖(FBG),用自动生化仪检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),采用考马斯亮兰蛋白法测24小时尿蛋白定量；用酶联免疫吸附法检测血浆内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、可溶性细胞黏附因子(sIC AM-1)、P-选择素(P-S)的含量、肾组织糖化蛋白及Na+-K+-ATP酶含量。结果：1对肾小球滤过功能的影响结果表明：模型对照组给药前后空腹血糖的含量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)；中、高剂量中药组、二甲双胍组与模型对照组比较,给药后的空腹血糖含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)；高、中剂量中药组间比较,高剂量中药组4周后的空腹血糖低于中药低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型对照组大鼠血浆BUN、SCr及24Upro水平明显高于空白对照组,中药组分高剂量组和二甲双胍组大鼠血浆BUN、SCr及24Upro含量,中药组分中剂量组大鼠BUN含量明显低于模型对照组(P<0.01,P<0.05)。光镜下肾脏病理形态学观察,空白组大鼠可见肾小球结构清晰,肾小囊腔宽大,细胞外基质与系膜细胞分布正常,模型组大鼠可见肾小球肿胀、充血,基底膜增厚,系膜增厚,肾小囊囊腔变小,呈裂隙状。肾小管内可见蛋白管型,肾小管上皮细胞广泛存在空泡样变性并有部分脱落；肾间质可见炎性细胞浸润及纤维化,部分小血管玻璃样变性。其中中药组分中、高剂量组大鼠光镜下肾小球、肾小管病理改变较模型组轻。2对大鼠血管活性物质的影响结果表明：模型对照组大鼠血浆ET-1、Ang Ⅰ、 AngⅡ、P-S、sICAM-1含量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)中、高剂量中药分组和二甲双胍组sICAM-1、ET-1、AngⅠ含量低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05),高剂量中药分组和二甲双胍组P-S、AngⅡ含量低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05),高、中、低剂量中药分组sICAM-1含量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)3对大鼠肾脏组织中糖化蛋白、Na+K+-ATP酶含量的影响结果表明：模型对照组肾脏组织中糖化蛋白、Na+-K+-ATP酶含量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量中药分组、二甲双胍组肾脏组织中糖化蛋白较模型对照组低,Na+-K+-ATP酶含量较模型对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),中、低剂量中药组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)结论：1.中药组分可以降低糖尿病肾病大鼠的血糖,少尿蛋白的排出,调节肾小球内皮细胞和系膜细胞的电荷及机械屏障,改善肾小球的滤过功能。2.中药组分可以减少糖尿病肾病大鼠血管活性物质分泌,抑制RAS系统及内皮素系统激活,减轻氧化应激,减轻肾小球内皮细胞及系膜细胞的损伤,减少细胞外基质形成,延缓肾小球硬化,保护肾功能。3.中药组分可以降低糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白非酶糖基化产物的形成,可能通过抑制MAPK信号传导通路,减轻氧化应激反应,减少系膜细胞增殖及细胞外基质成分的增加；提高肾组织Na+-K+-ATP酶含量,调节水液代谢,改善肾小球滤过功能,减轻肾小球肿胀,减轻基底膜增厚,保护肾功能。