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刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是人畜共患细胞内寄生性原虫,所致的弓形虫病呈世界性分布,全球约1/3的人受感染,严重危害人类和动物的健康。
本研究在猪体内进行了弓形虫SAG1基因重组伪狂犬病毒活载体疫苗的安全性评价和免疫效果评价。研究表明,该重组病毒在猪体内未造成毒害作用,同时弓形虫SAG1基因核酸疫苗、SAG1基因重组伪狂犬病毒活载体疫苗及二者联合免疫对猪均能诱导产生免疫保护作用,但以二者联合免疫的效果最好。
试验过程中,首先对重组伪狂犬疫苗病毒在猪体内的安全性进行了评价。分两组(rPRV/TgSAG1组和PRV组)对猪进行肌肉注射免疫(2mL,6×106/rnL),并在免疫结束后通过组织病理切片、免疫组化、排泄物中卵囊存留情况进行了检测。结果表明:在PRV易感器官未发现有病毒抗原存在,排泄物中无病毒的残留。通过以上试验表明:重组病毒在猪体内安全。为重组活载体疫苗的研制提供了科学理论依据。
同时设立了rPRV/TgSAG1、pcDNA3.1/TgSAG1和Prime-boost (pcDNA3.1/TgSAGl+rPRV/TgSAGl)免疫组,及pcDNA3.1、阳性对照组和空白组,在细胞免疫水平、体液免疫水平试验的检测中发现,rPRV/TgSAG1、pcDNA3.1/TgSAG1和Prime-boost均可有效的刺激机体产生免疫应答,且均达到较高水平。攻虫试验后,经病理组织检测和组织PCR检测,结果表明Prime-boost免疫组猪体能够明显有效地抑制弓形虫在易感组织内增殖,从而可以抵抗弓形虫感染,且明显强于rPRV/TgSAG1和pcDNA3.1/TgSAG1组免疫效果。
综上所述,本研究进行了重组病毒在猪体内的安全性和免疫应答研究,同时还开展了核酸疫苗与重组病毒联合性免疫实验研究,结果显示:重组病毒在猪体未见毒害作用;同时,Prime-boost免疫组较其他免疫组能够刺激机体产生更强的细胞免疫和体液免疫反应,这为弓形虫重组活载体疫苗的研制提供了理论依据。