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目的：
以足细胞病变为显著特点的肾小球疾病称为足细胞病(podocytopathy),当足细胞受损时,足突的正常结构发生改变,滤过膜完整性受到破坏,导致蛋白尿发生。足细胞病主要包括微小病变性肾小球病(MCD)、局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)、膜性肾病(MN)、糖尿病肾病(DN)等。本研究使用Desmin作为足细胞损伤的标志物、IgG4标志肾小球中抗PLA2R抗体,对上述各足细胞病患者肾组织标本中PLA2R、IgG4、Desmin表达和分布情况进行观察,以探讨上述足细胞病患者肾小球中足细胞损伤标志物-Desmin、肾小球固有蛋白-M型磷脂酶A2受体(PLA2R)及抗PLA2R抗体的表达变化及其相关关系。
方法：
实验组选取肾活检明确诊断特发性膜性肾病患者(IMN)33名;实验对照组选取狼疮继发性膜性肾病患者(LN-MN)15名,局灶节段性肾小球硬化症患者(FSGS)10名,微小病变性肾小球肾炎患者(MCD)16名和糖尿病肾病患者(DN)13名,LN-MN、FSGS、MCD、DN的诊断均符合相应指南的标准;正常对照组5例,选择由于泌尿系结石或是肿瘤切除肾脏远端的正常组织。使用冰冻切片免疫荧光染色检测各组患者肾组织标本中PLA2R、IgG4、Desmin表达情况。所得免疫荧光图片采用Metamorphhoffine软件进行半定量分析。所得数据使用SPSS17.0软件统计分析,计量数据采用x-±s表示,两组件差异比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(one-wayANOVA),两指标间关系用直线相关分析。P＜0.05差异有统计学意义。
结果：
正常对照的肾组织中Desmin为阴性,在其余实验各组患者的肾小球中均有Desmin表达,呈短线条样,分布不均,线条成簇,排列紊乱,其表达强度为IMN＞LN-MN＞DN＞FSGS＞MCD。在IMN患者的肾组织中PLA2R与IgG4呈颗粒状共位沉积于肾小球毛细血管襻。LN-MN患者中有3例PLA2R与IgG4呈颗粒状共位沉积于肾小球毛细血管襻;3例患者免疫复合物中仅有IgG4沉积,PLA2R呈线性表达,且IgG4荧光强度明显较IMN低;其余9例患者PLA2R亦呈线性表达,IgG4为阴性。正常对照组、DN、FSGS及MCD患者的肾组织中PLA2R皆呈线性表达,IgG4均为阴性。在IMN患者肾小球中,PLA2R与IgG4共位沉积物荧光强度与Desmin的荧光强度正相关。
结论：
在实验各组患者肾小球中皆能检测到Desmin的表达,提示各组患者肾小球中足细胞皆有不同程度的损伤。原发性膜性肾病靶抗原PLA2R在正常肾组织、DN、FSGS、MCD及部分LN-MN组中呈线性表达,在IMN患者肾小球中靶抗原PLA2R与抗PLA2R抗体呈颗粒状共同沉积于免疫复合物中,且表达与足细胞损伤标志物Desmin正相关。