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异育银鲫(Carassius auratus gibelio)是亚洲最受欢迎的食用鱼类,鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)是唯一已知的鲫鱼病毒病原体。Ⅰ型干扰素基因在病毒核酸被宿主细胞识别时诱导,被公认为在提供针对各种生物体中的病毒的局部或全身保护中的发挥重要作用。在转录组分析中发现部分异育银鲫基因响应 CyHV-2 感染的差异表达,部分干扰素转录物在被感染的异育银鲫肾中显著上调,该干扰素在本实验中被命名为异育银鲫IFNc(ccIFNc)。IκBα(Inhibitor of NF-κB),Rab21(Rab GTPase21)在先天免疫中起重要作用,它们被抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization ,SSH)证实为感染鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)的异育银鲫中差异表达的免疫相关基因。通过RACE技术进一步确定了异育银鲫IFNc,IκBα,Rab21的完整ORF, IFNc的全长cDNA包含一个549 bp的开放阅读框(ORF),编码182个氨基酸的蛋白(GenBank登录号BankIt2033924),异育银鲫IκBα的全长cDNA包含一个933bp的开放阅读框(ORF),编码310个氨基酸的蛋白(GenBank登录号KJ784543),Rab21的全长cDNA包含一个648 bp的开放阅读框(ORF),编码215个氨基酸的蛋白(GenBank登录号KJ784545)。系统发育分析表明,ccIFNc与来自其他水生生物的已知Ⅰ型IFN基因聚类,IκBα,Rab21显示出与其他硬骨鱼中的转录物高度同源。定量RT-PCR分析表明,健康异育银鲫中,IκBα,Rab21在所检测的所有鲫鱼组织中均以低水平表达,这些基因在CyHV-2感染后6-24小时在肾中显著上调(P <0.01),数据表明IκBa,Rab21可能有潜在的抗病毒功能,IκBα和Rab21 可作为宿主对 CyHV-2 感染免疫反应的免疫标记。健康异育银鲫中, ccIFNc 在脾,鳃,肾和肌肉中具有相对较高的表达水平。在 CyHV-2 的攻击下,ccIFNc 的转录水平在所有组织中都有明显上调,尤其是在脾和鳃中,分别增加了 436 和 158 倍。肌肉( i.m. )注射编码 ccIFNc 的真核表达质粒(pEGFP-cIFNc)观察到ccIFNc表达明显增加高于对照细胞15倍,CyHV-2的复制效率显着低于对照组,过表达IFNc的异育银鲫总体死亡率降低了30%,死亡时间有所延迟,本文研究表明,ccIFNc 属于Ⅰ型干扰素家族,在对抗鲫鱼CyHV-2感染方面具有潜在的作用。