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传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种禽类高致病性传染病,目前已知两个血清型I和II。鸡为I型血清型的唯一自然宿主,病毒主要感染3～6周龄的鸡,造成严重的免疫抑制甚至死亡。IBD引起病鸡极度虚弱,食欲废绝,排白色水样稀便等临床症状;剖检可见法氏囊萎缩,肾脏尿酸盐沉积,胸肌、腿肌出血,并引起严重的免疫抑制,给养鸡业造成巨大经济损失。桑杜口服液(Mori Folium and Eucommiae Cortex Oral Solution,MFEC)是由桑叶和杜仲制成,有助于增强机体免疫力,促进免疫器官发育。本试验为了研究MFEC对IBD的防治效果,试验制备化学药物和IBDV感染诱导的法氏囊损伤为表现的免疫抑制模型,评价其对免疫抑制的调节作用和法氏囊疫苗(B87)的增效作用,为MFEC的临床应用提供试验依据。首先,试验通过注射环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy;40 mg/kg)建立鸡免疫抑制模型,研究MFEC对鸡免疫抑制的防治效果。将120只1日龄雏鸡饲养至13日龄,分为空白对照组(Blank Control,BC)、疫苗对照组(B87 Vaccine Control,B87)、环磷酰胺组(Cy+B87)和桑杜口服液低、中、高剂量组,分别为MFECL(4.8 g/kg)+Cy+B87;MFECM(9.6 g/kg)+Cy+B87;MFECH(19.6 g/kg)+Cy+B87,每组 20 只。MFECL+Cy+B87、MFECM+Cy+B87、MFECH+Cy+B87 组口服不同剂量的 MFEC,其他组灌服生理盐水,连用7 d。16日龄时,除BC组和B87组注射生理盐水外,其他各组予以Cy 40 mg/kg胸肌注射,连用3d建立免疫抑制模型;19日龄时,BC组给予生理盐水作对照,其余各组免疫传染性法氏囊疫苗B87,7 d后进行二次免疫。35日龄扑杀,通过法氏囊组织切片HE染色、血清抗体水平检测等手段来评价不同剂量MFEC对Cy诱导免疫抑制的调节作用。结果显示,MFEC可缓解Cy造成的法氏囊指数下降、改善法氏囊滤泡损伤、下调IL-2和IL-6 mRNA在法氏囊组织中的表达,同时还提高了 B87疫苗抗体生成水平。由此可见,MFEC可以抑制或减轻Cy造成的组织损伤及免疫抑制,其中MFECM 9.6 g/kg预防效果最佳。为进一步研究MFEC对IBD的预防作用,将30 只 SPF鸡分为空白对照组(Blank Control,BC)、感染对照组(IBDV Control,IBDV)、桑杜口服液处理组(MFEC+IBDV)。22日龄,MFEC+IBDV组灌服MFEC(9.6 g/kg),其它两组灌服生理盐水,连用7d。25日龄时IBDV组和MFEC+IBDV组通过滴鼻点眼途径感染IBDV,BC组通过滴鼻点眼给予生理盐水。然后观察各组发病率、临床症状和死亡率。结果显示:与IBDV组相比,MFEC+IBDV组感染IBDV后死亡率降低了 20%,腿肌出血、肾脏尿酸盐沉积程度也有所降低,故认为MFEC可减轻IBD造成的损伤,但未达到理想效果。在上述试验基础上,我们将疫苗剂量减半接种SPF鸡以建立不完全免疫的动物模型,在此基础上使用MFEC预防IBDV感染,研究MFEC对B87疫苗的增效作用。试验将80只SPF鸡分为4组,分别为空白对照组(BC组)、IBDV感染对照组(IBDV组)、疫苗对照组(B87+IBDV组)和疫苗与桑杜口服液联用组(MFEC+B87+IBDV组)。饲养至19日龄,B87+IBDV组和MFEC+B87+IBDV组免疫正常剂量1/2的B87疫苗;饲养至22日龄,MFEC+B87+IBDV组服用MFEC(9.6 g/kg),连用7 d;25日龄时除BC组外,其它各组均感染IBDV建立免疫抑制模型,并于32日龄扑杀,期间观察临床症状,检测血清抗体生成水平、生化指标、组织切片HE染色、法氏囊组织内细胞凋亡以及IBDV-VP2、IL-6、IFN-γ mRNA 表达变化。结果表明:与 B87+IBDV 组相比,MFEC+B87+IBDV组可有效减少发病率,提高抗体生成水平;HE染色可见组织损伤明显减轻,免疫组化和Western blot检测凋亡蛋白Bax的表达量下降、Bcl-2的表达量上升,同时显著降低IBDV-VP2、IL-6、IFN-y mRNA在法氏囊组织中的表达(P<0.05)。这说明MFEC可有效提高B87疫苗免疫效果,并能减少IBDV的入侵和复制,改善IBDV感染引起的组织损伤和细胞凋亡并抑制炎症的产生。以上研究表明,MFEC可有效提高Cy或IBDV感染等情况造成的机体免疫力下降,促进免疫器官发育,调节免疫抑制,增强B87疫苗的抗体水平,故有望作为免疫增强剂来开发。