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前期实验发现，肿瘤细胞释放的自噬小体(TRAP)可被B细胞所摄取，诱导B细胞活化并促进B细胞分泌抗体和细胞因子，特别是分泌高水平的IL-10。而可分泌高水平的IL-10，是Bregs的重要特征。但是肿瘤细胞释放的自噬小体是否可诱导B细胞进一步分化为IL-10+B细胞或者Bregs，目前尚不清楚。 目的： 研究肿瘤细胞释放的自噬小体(TRAP)能否进一步诱导B细胞分化为IL-10+B细胞;探讨TRAP诱导产生的IL-10+B细胞是否有免疫抑制功能;探讨TRAP诱导IL-10+B细胞的物质基础及机制;研究肿瘤患者体内是否含有自噬小体以及是否可诱导IL-10+B细胞的产生。 方法： 1.采用TRAP体外刺激野生型小鼠脾细胞，同时用LPS刺激脾细胞作为对照，72h后收获细胞及细胞培养上清，流式细胞术检测IL-10+B细胞的比例变化;ELISA法检测细胞培养上清中IL-10的含量。磁珠分选小鼠B细胞，与不用浓度的TRAP37℃共孵育72h;或分别与肿瘤培养上清，等体积去除TRAP的肿瘤培养上清，以及等体积培养上清所获TRAP共孵育72h，收集培养上清，ELISA法测检测培养上清中IL-10的分泌水平。 2.分选出WT C57BL/6小鼠的CD4+T和CD8+T细胞并用CFSE标记，放入有抗CD3抗体预包被的孔板中并加入抗CD28抗体以刺激T细胞增殖。同时，在抗CD3抗体/CD28诱导的T细胞增殖体系中加入TRAP诱导的WT B细胞或IL-10-/-B细胞共培养或用Transwell小室隔开培养，流式细胞术检测T细胞增殖情况。分离OT-1小鼠脾细胞并用OVA257-264肽刺激其增殖，同时与E.G7-OVA(OVA+)或EL4(OVA-)细胞来源的TRAP诱导的B细胞共孵育，96h后流式细胞术检测T细胞增殖情况。 结果： 1.与肿瘤细胞裂解液刺激组相比，TRAP体外诱导小鼠B细胞分化为IL-10+B细胞的比例显著增高。肿瘤细胞培养上清也可刺激B细胞分泌IL-10，并与等量培养上清中所获TRAP的刺激效果没有明显差别;但去除TRAP的肿瘤细胞培养上清刺激B细胞分泌IL-10明显下降。 2.CD4+T细胞和CD8+T细胞的CFSE衰减率分别为5％和12％，而且与TRAP诱导的B细胞和T细胞混合培养导致的CD4+T细胞和CD8+T细胞CFSE衰减率下降（4％和10％）相比较，没有明显差异。未免疫组荷瘤小鼠中位生存时间为20天，DC/OVA免疫组小鼠和未刺激B细胞组的中位生存时间分别为31天和29天，但过继转移OVA+TRAP或OVA-TRAP诱导B细胞组的中位生存时间分别为22天和23天，明显短于未刺激B细胞组。 结论： 1.肿瘤细胞可自发释放自噬小体(TRAP)到细胞外;TRAP体内、体外均可诱导B细胞分化为分泌高水平IL-10、具有CD1d+CD5+细胞表型特征的调节性B细胞。 2.TRAP诱导IL-10+B细胞主要通过IL-10抑制CD4+和CD8+T细胞的增殖、而不依赖细胞间相互接触，且以抗原非特异性的方式发挥抑制性功能;过继输入TRAP诱导IL-10+B细胞能以抗原非特异性方式抑制DC疫苗诱导的T细胞免疫应答及其介导的抗肿瘤作用。