中药止痛巴布贴对物理性致痛及胫骨癌痛模型鼠的镇痛效果研究

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目的:本研究通过建立小鼠疼痛模型(即热板法实验模型和鼠尾加压法实验模型),观察中药止痛巴布贴对小鼠的镇痛效果;通过建立小鼠跳跃模型,观察应用中药止痛巴布贴后小鼠的成瘾性;通过向C57BL/6小鼠胫骨骨髓腔内注射LLC,建立胫骨癌痛模型并予中药止痛巴布贴外用,观察骨癌痛对小鼠行为学的影响及中药止痛巴布贴对癌痛小鼠的镇痛效果。以期借助以上实验的研究的数据及结果,探讨中药止痛巴布贴对疼痛的治疗作用,为临床用药的应用提供依据。材料与方法:1.材料SPF级动物实验室、SPF级昆明种小白鼠、C57BL/6小鼠、Lewis细胞株、热板测痛仪、鼠尾压痛仪、电子天平、恒温水浴箱、Olympus BX51显微镜、热辐射刺激仪、von Frey纤毛、细胞计数板、液氮、国产台式离心机、中药止痛巴布贴、扶他林乳膏、6%硫化钠溶液、盐酸纳洛酮注射液、青霉素-链霉素、DMSO、FBS、D-Hanks溶液、DMEM高糖培养基。2.方法热板法实验中将小鼠置于热板测痛仪上测定各组小鼠用药前后痛阈值变化,鼠尾压痛法实验中将小鼠尾部距尾尖1/3处加压,测定各组小鼠用药前后痛阈值的变化,进而对中药止痛巴布贴的镇痛效果进行评价;参照并改进schwei MJ等[1]的方法建立小鼠骨癌痛模型。观察各组小鼠的一般状态(如进食情况、体重变化)。对各组小鼠进行疼痛行为学检测(如机械性触诱发痛检测、热刺激的阈值检测、自发痛行为学检测)和影像学观察;通过小鼠跳跃实验判定该药的成瘾性结果:1.中药止痛巴布贴镇痛效果的热板法实验研究:用药前后各组小鼠痛阈差值比较:空白组与基质组无统计学差异P=0.98>0.05,空白组与中药各剂量组、阳性对照组有统计学差异P<0.05;剂量1组、剂量2组、剂量3组、剂量4组用药前后痛阈差值比较发现,痛阈值的增高程度和用药剂量的大小成正相关。2.中药止痛巴布贴镇痛效果鼠尾加压实验研究:用药前后各组小鼠痛阈差值比较:空白组与基质组之间无统计学差异P>0.05,空白组与中药各剂量组、阳性对照组比较有统计学差异P<0.05;各组痛阈差值比较发现:剂量4组>剂量3组>剂量2组>剂量1组,痛阈值的增高程度和用药剂量的大小成正相关。3.在对胫骨癌痛模型鼠疼痛行为学检测中,模型组小鼠出现了痛觉增敏现象,具体表现为疼痛的程度随着时间的增加而加重。测量各组小鼠痛阈值并比较发现:镇痛效果随着各剂量组药物剂量的增加而增强。4.小鼠跳跃实验:空白组、基质组、中药组之间无统计学差异。阳性对照组与各组间存在统计学差异P<0.05.结论:1.中药止痛巴布贴具有明显镇痛效果热板法、鼠尾加压法疼痛模型鼠实验中:各组实际镇痛效果比较,剂量4组>剂量3组>剂量2组>剂量1组>基质组=空白组。2.中药止痛巴布贴镇痛效果具有剂量相关性。3.中药止痛巴布贴对骨癌痛模型鼠有镇痛作用,随着剂量的增加其镇痛效果增强。4.中药止痛巴布贴使用安全,无成瘾性。
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