【摘 要】
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目的 大肠癌是我国发病率很高的恶性肿瘤,其早期诊断有重要意义。早期发现播散在外周血中的微量瘤细胞对估计肿瘤的发生、发展及预后有重要意义。逆转录聚合酶链式反应酶联免
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目的 大肠癌是我国发病率很高的恶性肿瘤,其早期诊断有重要意义。早期发现播散在外周血中的微量瘤细胞对估计肿瘤的发生、发展及预后有重要意义。逆转录聚合酶链式反应酶联免疫吸附测定(reverse transcriptase polymerase chain reaction enzyme linked immunosorbent assay,RT-PCR-ELISA)用于检测肿瘤特异性基因的表达,操作简单,敏感性高,可有效检测大肠癌患者外周血中的微量癌细胞。Survivin是凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成员,位于人类染色体17q25,编码一个16.5KD的蛋白质,Survivin蛋白只有一个BIR区(杆状病毒IAP重复区)羧基端缺乏锌指折叠结构,Survivin表达于胚胎组织,而在正常成人组织中停止表达,但在人类各种恶性肿瘤组织中重新表达,可作为肿瘤标记物。本实验采用RT-PCR-ELISA方法检测大肠癌患者外周血中Survivin mRNA的表达情况,分析大肠癌患者外周血中Survivin mRNA表达的临床意义及作为肿瘤标记物的敏感性和特异性。 材料与方法 一、实验材料 本研究收集中国医科大学附属第一医院肿瘤科大肠癌患者外周血标本30例及25例健康人外周血做对照。 二、实验方法 取患者外周血1ml,EDTA抗凝,离心分离血细胞,提取总RNA,RT-PCR反应后,将产物在包被Survivin mRNA探针的ELISA板上进行分子杂交,之后进行ELISA反应,经酶标仪(波长为450/630nm)读取光密度值,绘制标准曲线计算标本Survivin mRNA浓度。采用X~2检验比较Survivin mRNA在患者及健康人外周血表达和Survivin mRNA表达与大肠癌病理生物
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