白桦长纤维性状分子标记的分析和鉴定

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:assembly2010
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白桦(Betula platyphylla)为我国东北与内蒙古地区的先锋树种,是非常优良的短周期阔叶纸浆用材树种。纤维长度是影响纸张品质的主要因素之一,为了加速长纤维白桦纸浆材新品种选育进程,本文进行了以下研究。通过测定和分析帽儿山实验林场583株白桦和哈尔滨林场200株白桦纤维长度的分布特点,不仅说明纤维长度性状是典型数量性状、适合采用分子标记技术进行研究,而且分别从中选择出能代表这2个群体的100株个体组成分析群体用于长纤维性状分子标记分析、50株验证群体用于长纤维标记的验证。通过系统研究影响白桦叶片基因组DNA提取效果的各种因素,提出适合富含多糖及其他次生物质的白桦叶片基因组DNA提取方法:常温下分别采用SET和CTAB溶液洗涤经过研磨的叶片材料2~3次,将首次沉淀的离心力和时间降到6080g 5min,将沉淀剂由异丙醇改为无水乙醇,这种方法能分离出高质量的白桦叶片基因组DNA。建立了稳定的白桦RAPD体系。通过纤维长度与RAPD标记的多元回归分析,得到6条与纤维长度呈显著相关的RAPD片段,并全部转化为可用于辅助选择育种的SCAR标记。这些SCAR标记对长纤维个体的平均鉴定率达79%,对短纤维个体的鉴定率达88%,其中SCAR-R16对长纤维的鉴定率达92%,而对短纤维个体的错误扩增仅为4%,是6个来自RAPD片段的SCAR标记中对长纤维个体鉴定能力最高的标记。建立了稳定的白桦ISSR体系。通过纤维长度与ISSR标记的多元回归分析,得到4条与纤维长度呈显著相关的ISSR片段,并全部转化为可用于辅助选择育种的SCAR标记。3个长纤维性状SCAR标记对验证群体中的长纤维个体平均鉴定率为84%、对短纤维的平均鉴定率为80%,其中SCAR-132对长纤维的鉴定率达92%,对短纤维个体的错误扩增为4%,是3个来自ISSR片段的SCAR标记中对长纤维个体鉴定能力最高的标记。短纤维SCAR标记对短纤维个体的鉴定率为80%、对长纤维也产生了高达16%的扩增率。建立了稳定的白桦AFLP体系。通过纤维长度与AFLP标记的多元回归分析,得到了7条与白桦纤维长度呈显著相关的AFLP片段,并全部转化为可用于辅助选择育种的SCAR标记。这7个SCAR标记对验证群体中的长纤维个体平均鉴定率达85.2%、对短纤维的平均鉴定率为86.3%。其中SCAR-A5/2对长纤维的鉴定率达96%,而对短纤维个体的错误扩增仅为8%,是7个来自AFLP片段的SCAR标记中对长纤维个体鉴定能力最高的标记。
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