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本研究以枯草芽孢杆菌菌株A(CGMCC No.1982)为出发菌株,采用氯化锂和紫外线复合诱变处理,获得了遗传稳定、拮抗效果高的诱变菌株J4-1。以诱变菌株为材料,研究了不同液体培养基条件下菌株的生长规律,利用发酵罐(20 L)研究了发酵过程中培养基残碳、残氮、溶氧、pH的变化规律,最终确定了生防菌株发酵生产的工艺参数,为实现生防菌的产业化奠定了基础。以获得的发酵液为原料,开发出蔬菜大棚专用生防菌剂、水果专用防腐保鲜纸(袋)等剂型。同时在实验室和田间对生防菌剂的防病、保鲜效果进行了试验,结果表明:开发的剂型在实验室和田间对蔬菜主要病害均有良好的防治效果,研制的生物保鲜纸对梨、葡萄均有较好的防腐保鲜效果。具体研究结果如下:1、以枯草芽孢杆菌菌株A为出发菌株,玉米小斑病菌为指示菌,采用氯化锂紫外线复合诱变处理,经过4次诱变,得到了高拮抗活性诱变菌株J4-1,拮抗活性与出发菌株相比提高了64.5%,且具有良好的遗传稳定性。2、采用正交试验设计,对诱变菌株最适碳氮源进行优化,得到发酵培养基配方:葡萄糖1%,蔗糖3%,蛋白胨酵母膏复合物3%,(NH4)2SO4 2%,水补齐。根据菌体在发酵培养基中的生长曲线,发酵过程中pH、残糖、残氮变化曲线将发酵周期延长至42 h,并取消了流加补料工艺。优化后的发酵工艺发酵液活菌数为(3.132±0.376)×1011cfu/mL。3、研制开发出生防菌剂全发酵液液体剂型,主要成分有:0.29‰凯松、0.1%尼泊金甲酯、1%吐温-20、0.5%山梨醇、pH值8,其余全发酵液补齐。采用灌根、喷施方法对生防菌液的防病效果进行了田间试验,结果表明:(1)菌液对温室大棚青椒枯萎病的防治效果显著高于正常管理(化学农药);对白粉病的防治效果接近正常管理。(2)菌液对温室大棚黄瓜褐斑病防效与正常管理(化学农药)差异不显著。(3)菌液对温室大棚番茄灰霉病的防效可达正常管理(化学农药)的65%以上。(4)菌液对大田葡萄褐斑病、霜霉病的防效与喷施化学农药的正常管理区无显著差异。4、研制开发出生防菌水果防腐保鲜纸(袋)。将发酵液均匀涂布于市售包装纸上,菌体含量为(4.62±0.293)×108 cfu/cm2左右,用于水果防腐保鲜。将发酵液均匀涂布于水果套袋上,菌体含量为:(3.39±0.323)×109 cfu/cm2,用于水果生产套袋。用水果防腐保鲜纸进行梨保鲜试验,结果显示:常温下保存45 d后,防腐保鲜纸处理梨的失重率为26.84%,烂果率为13.33%,均显著低于对照,防腐保鲜效果明显。用水果防腐保鲜袋对大田葡萄果实进行套袋,结果表明:对葡萄果实炭疽病的防效接近喷施化学农药的正常管理。