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引言心力衰竭是各种心脏疾病的最终结局,尽管心力衰竭的治疗近年出现了快速发展,但死亡率仍居高不下,尤其是对终末期心力衰竭缺乏明确有效的治疗方法。近年研究发现,在慢性心衰过程中,有多种miRNAs的表达上调。MiRNAs在循环血中能稳定存在,可以方便快速的非侵入性检测,具有重要的临床应用价值,可能成为新的诊断标志物,或作为药物治疗靶点为心脏疾病治疗研究新的药物。但目前有关miRNAs在心血管系统疾病中的作用还知之甚少,尤其在心力衰竭不同时期miRNAs水平的变化如何报道少见。心力衰竭的机制之一是心肌细胞的凋亡, HO-1/CO-胆红素系统具有抗氧化、抗凋亡的作用,有研究提示在心衰的病理生理过程中HO-1/CO-胆红素系统可能起保护作用,但是在心力衰竭的不同时期血红素氧合酶-1尚不清楚。为此,我们通过检测慢性心力衰竭患者血清miRNAs及血红素氧合酶-1的变化,以探讨慢性心力衰竭患者基因表达调控及神经内分泌调节的改变与心功能的关系。论文Ⅰ慢性心力衰竭患者血清miRNAs的变化及与心功能的关系背景及目的MiRNAs (microRNAs)是一类长度大约为18-24个核苷酸序列的内源性小RNA,通过与靶mRNA的3，非编码区结合,阻止该段基因的蛋白表达。目前认为,人类绝大部分的蛋白编码基因都有其靶向miRNA与之相对应。其性质高度保守,在血清中可以稳定存在,在各种生理及病理生理过程中发挥着重要的调控作用。国外有研究报道,一些miRNAs在慢性心力衰竭的动物模型中有表达水平的升高,在慢性心衰患者血清中表达也有升高,但心力衰竭不同的时期rmiRNAs水平的变化如何以及与现有的检测方法相关性目前报道少见。本研究旨在通过检测慢性心力衰竭患者血清中的lmiRNAs水平来探讨其在慢性心力衰竭患者中的变化及意义。方法1、选取慢性心力衰竭患者147例(心衰组),依据NYHA心功能分级标准评价患者的心功能,将心衰组分为4个亚组：心衰Ⅰ亚组(NYHAⅠ级35例)、心衰Ⅱ亚组(NYHAⅡ级38例)、心衰Ⅲ亚组(NYHAⅢ级34例)、心衰Ⅳ亚组(NYHAⅣ级40例)。同时选取我院体检中心同期体检健康正常者30例(对照组)。2、血清miRNA提取试剂盒提取miRNA,通过qRT-PCR技术检测血清miR-181c-5p、miR-214-3p、miR-423-5p的相对水平。3、电化学发光法检测血清N末端脑钠肽(NT-proBNP),罗氏Cobas E601免疫分析仪检测血清hs-cTnT,全自动生化仪检测总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血脂、血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐等生化指标,化学发光法测游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素水平。4、采用PHILIPS IE33彩色多普勒血流仪双平面Simpson法测量心脏参数：左心房内径(LAd)、左心室舒张末期内径(LVEDd)及左心室射血分数(LVEF)。结果1、各组患者miRNAs表达水平的比较①各组患者niR-423-5p表达水平的比较心衰组较对照组血清miR-423-5p表达水平显著升高(5.41±0.78vs4.97±0.56)(P<0.05)；心衰Ⅳ亚组血清miR-423-5p表达水平较心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组有显著差异(6.21±0.67,5.05±0.49,5.11±0.53,5.19±0.51)(P<0.05),对照组、心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组之间比较无显著性差异(p>0.05)。②各组患者miR-181c-5p表达水平的比较心衰组较对照组血清miR-181c-5p表达水平(1.67±0.39vs1.61±0.42)以及心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ亚组之间血清miR-181c-5p表达水平均无显著性差异(1.68±0.38,1.63±0.40,1.74±0.39,1.75±0.43)(P>0.05).③各组患者miR-214-3p表达水平的比较心衰组较对照组血清1niR-214-3p表达水平(1.86±0.44vs1.86±0.38)以及心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ亚组之间血清miR-214-3p表达水平(1.87±0.37,1.98±0.41,2.00±0.39,2.03±0.42),均无显著性差异(P>0.05)。2、心衰组患者血清miR-423-5p表达水平与NT-proBNP浓度、hs-cTnT浓度、LAd. LVEDd, LVEF的相关分析miR-423-5p表达水平与NT-proBNP、hs-cTnT呈正相关(r分别为：0.562,0.543,P<0.01)(Spearman相关)；与LAd、LVEDd无明显相关(r分别为：0.290,0.268,P<0.01)(Pearson相关),与LVEF无明显相关(r=-0.271, P<0.05)(Spearman相关)。3、miR-423-5p的ROC曲线下面积：AUC=0.714(P<0.01)。结论1、慢性心力衰竭终末期患者血清miR-423-5p水平升高,能较好反映心功能状况,但血清miR-423-5p水平在心力衰竭早期无变化。2、在慢性心力衰竭患者血清miR-181, miR-214水平无变化。论文Ⅱ血红素氧合酶-1在慢性心力衰竭患者中的变化及其意义背景及目的血红素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)是血红素代谢过程中的关键酶,可以催化血红素分解产生一氧化碳(carbon monoxide, CO)亚铁离子(Fe2+)和胆绿素,胆绿素可进一步还原生成胆红素。近年研究证实,HO-1/CO-胆红素系统具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、扩血管等作用,对心血管系统有重要的保护意义,有研究提示在心力衰竭时HO-1/CO-胆红素系统可能被激活,在心衰的病理生理过程中起到保护作用,影响患者预后。但是在心力衰竭的不同时期HO-1/CO-胆红素系统的变化如何目前尚不清楚。本研究通过检测慢性心力衰竭患者血清HO-1的表达水平来探讨其在慢性心力衰竭患者中的变化及意义。方法1、选取慢性心力衰竭患者147例(心衰组),依据NYHA心功能分级标准评价患者的心功能,将心衰组分为4个亚组：心衰Ⅰ亚组(NYHA Ⅰ级35例)、心衰Ⅱ亚组(NYHAⅡ级38例)、心衰Ⅲ亚组(NYHAⅢ级者34例)、心衰Ⅳ亚组(NYHAⅣ级40例)。同时选取我院体检中心同期体检健康正常者30例(对照组)。2、人血红素氧合酶(HO-1)ELISA试剂盒检测血清HO-1表达水平。3、电化学发光法检测血清N末端脑钠肽(NT-proBNP),罗氏Cobas E601免疫分析仪检测血清hs-cTnT,全自动生化仪检测总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血脂、血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐等生化指标,化学发光法测游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素水平。4、采用PHILIPSIE33彩色多普勒血流仪双平面Simpson法测量心脏参数：左心房内径(LAd)、左心室舒张末期内径(LVEDd)及左心室射血分数(LVEF)。结果1、各组患者血清HO-1表达水平(ng/mL)的比较心衰组较对照组血清HO-1表达水平显著升高(19.1±3.6vs15.9±4.0)(P<0.05)；心衰Ⅳ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组差异有统计学意义(24.7±3.7,15.8±3.9,16.7±3.5,20.3±3.3)(P<0.05)；心衰Ⅲ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ亚组差异有统计学意义(20.3±3.3,15.8±3.9,16.7±3.5)(P<0.05)。心衰Ⅰ、Ⅱ亚组与对照组之间差异无统计学意义(15.8±3.9,16.7±3.5,15.9±4.O)(P<0.05).2、各组患者TBIL、DBIL、IBIL(μmol/L)浓度的比较①心衰组较对照组TBIL显著升高(27.3±6.5vs17.4±5.4)(P<0.05)；心衰Ⅳ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组差异有统计学意义(37.7±4.5,18.6±5.3,20.1±5.5,28.7±4.2)(P<0.05)；心衰Ⅲ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ亚组差异有统计学意义(28.7±4.2,18.6±5.3,20.1±5.5)(P<0.05)。心衰Ⅰ、Ⅱ亚组与对照组之间差异无统计学意义(18.6±5.3,20.1±5.5,17.4±5.4)(P>0.05)。②心衰组较对照组DBIL显著升高(7.1±3.2vs4±1.9)(P<0.05)；心衰Ⅳ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组差异有统计学意义(8.2±2.0,4.2±2.0,4.8±1.9,6.9±1.6)(P<0.05)；心衰Ⅲ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ亚组差异有统计学意义(6.9±1.6,4.2±2.0,4.8±1.9)(P<0.05)。心衰Ⅰ、Ⅱ亚组与对照组之间差异无统计学意义(4.2±2.0,4.8±1.9,4.0±1.9)(P<0.05).③心衰组较对照组IBIL显著升高(20.2±7.5vs14.0±4.8)(P<0.05)；心衰Ⅳ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组差异有统计学意义(29.5±4.7,14.4±4.5,15.3±5.0,21.8±4.4)(P<0.05),心衰Ⅲ亚组较心衰Ⅰ、Ⅱ亚组差异有统计学意义(21.8±4.4,14.4±4.5,15.3±5.0)(P<0.05)。心衰Ⅰ、Ⅱ亚组与对照组之间差异无统计学意义(14.44±4.5,15.3±5.0,14.0±4.8)(P＞0.05)。3、心衰患者血清HO-1水平与TBIL、 DBIL、 IBIL/NT-proBNP、 hs-cTnT浓度、LVEF、LAd、LVEDd相关分析心衰患者血清HO-1浓度与TBIL、 DBIL、 IBIL均呈正相关(Pearson相关)(r分别为：0.572,0.562,0.518,P<0.01)；与NT-proBNP浓度浓度呈正相关(r=0.559,P<0.01),与LVEF呈负相关(r=-0.600,P<0.01)；与hs-cTnT浓度无明显相关(r=0.480,P<0.01)(Spearman相关)；与Lad、 LVEDd无明显相关(r分别为0.342,0.342,P<0.01)(Pearson相关)。结论慢性心力衰竭患者随着心衰的发展血清HO-1及胆红素水平升高。