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本文旨在研究早期缺铁对断奶仔猪肠道铁吸收代谢、肠道发育等的影响,同时筛选出仔猪缺铁早期血清标志物,并在缺铁仔猪模型的基础上,探索一天中不同时间补铁对体内铁沉积以及铁代谢相关基因的影响。 试验一:早期缺铁对断奶仔猪肠道形态学、铁吸收及肠道屏障功能等的影响研究研究方案:选用20-22日龄断奶仔猪(杜×长×大)24头,公母各半,单栏饲喂。其中对照组(Control)12头,饲喂基础日粮(低铁日粮+100mg/kg FeSO4),缺铁组(ID)12头,饲喂低铁日粮。低铁日粮中铁含量为29mg/kg。试验开始后,每隔7天测定仔猪血常规和血清生化指标,检查仔猪是否处于缺铁状态。确定仔猪处于缺铁状态后,屠宰采样。实验结果发现,饲喂低铁日粮42天后,缺铁日粮组仔猪的血红蛋白、血清铁显著降低(p<0.05),同时铜蓝蛋白、铁不饱和结合力显著升高(p<0.05),生长性能差异不显著(p>0.05),因此早期缺铁模型建立成功。铁吸收过程主要发生在十二指肠和空肠上部。与对照组相比,发现十二指肠绒毛显著增长(p<0.05);在十二指肠中,Cybrd(Duodenal cytochrome)、DMT1(Divalent Metal Transport1)、FPN(Ferroportin)、TFRC(Transferrin Receptor)和FTL(Ferritin light chains)表达显著升高(p<0.05);空肠中DMT1显著升高(p<0.05);回肠中的TFRC与FTL显著升高(p<0.05);早期缺铁仔猪十二指肠,空肠,回肠紧密结合蛋白基因表达量显著降低(p<0.05)。可见,早期缺铁通过影响断奶仔猪的肠道结构和铁吸收相关基因表达提高铁的吸收率,但与此同时肠道的紧密结合蛋白显著下降,表明早期缺铁影响肠粘膜屏障完整性,可能引起肠道损伤。 试验二:断奶仔猪缺铁早期标志物物筛选研究 研究方案:选用20-22日龄断奶仔猪(杜×长×大)24头,公母各半,单栏饲喂。其中对照组(Control)12头,饲喂基础日粮(低铁日粮+100mg/kg FeSO4),缺铁组(ID)12头,饲喂低铁日粮。低铁日粮中铁含量为29mg/kg。饲养期42天。禁食12h后,颈静脉采血,分离血清,进行蛋白质组学和代谢组学分析。通过差异蛋白质组学技术找到24种差异蛋白,分别是Complement component C9、Isoform C of Prelamin-A/C、Tetranectin、Platelet glycoprotein Ib alpha polypeptide、Proteasome subunit beta type-7、Periostin、BTRC、Proteoglycan4、IgG heavy chain、Bax inhibitor1、Proteasome subunit alpha type、Slit homolog1protein、Prothrombin、BRCA2-interacting transcriptional repressor、Out at first protein homolog、Ras-related C3botulinum toxin substrate3、Ubiquitin-specific peptidase7、Tissue inhibitor of metalloproteases-2、Carboxypeptidase、Phosphoinositide phospholipase C、Fetuin-B、Chemerin、IgA heavy chian constant region(Fragment)、Connective tissue growth factor。通过差异代谢组学技术找到了8种差异性代谢物,分别为赖氨酸、精氨酸、乙酰氨基丁醛、谷氨酰胺、脯氨酸、烟酸酯、氨基丁醛,蛋氨酸。通过GO功能注释和KEGG通路分析,差异表达的蛋白及代谢物与机体内的细胞代谢、蛋白质合成和免疫反应相关。免疫反应可能为动物缺铁的首要反应,缺铁可能会引起氨基酸代谢紊乱。 试验三:日动态饲喂铁的模式对缺铁仔猪补铁效率的影响 研究方案:选用20-22日龄断奶仔猪(杜×长×大)18头,公母各半,饲喂低铁日粮。42天后,对仔猪进行称重,按照体重和性别随机分为三组:对照组早晚各饲喂基础日粮(FeSO4,以Fe计,100mg/kg);早高晚低组(HL)早上饲喂高铁日粮(FeSO4,以Fe计,200mg/kg),晚上饲喂低铁日粮(FeSO4,以Fe计,0mg/kg);早低晚高组(LH)早上饲喂低铁日粮(FeSO4,以Fe计,0mg/kg),晚上饲喂低铁日粮(FeSO4,以Fe计,200mg/kg)。其中低铁日粮铁含量为29mg/kg。21天后,对仔猪进行屠宰,采集血液、肝脏和小肠,并分析组织铁浓度和铁平衡相关基因表达。结果表明,在肝脏和脾脏中,LH组的铁浓度明显高于HL组(p<0.05)。在肝脏中,LH组铁调素的表达水平明显高于HL组(P<0.05)。此外,在LH组的十二指肠中,DMT1、CYBRD1和TFRC等铁吸收相关基因的表达水平显著提高(p<0.05)。本研究表明,早低晚高的动态补铁方式可以提高组织的微量元素沉积,提高肝脏及肠道的铁代谢吸收相关的mRNA表达水平;晚上补铁更有利于提高铁的生物利用率。