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目的:探讨肺癌患者血清中可溶性程序性死亡配体1(soluble programmed death ligand-1,sPD-L1)的表达及临床意义;观察表皮生长因子受体(EGFR)野生型和敏感突变型肺癌细胞株膜型及sPD-L1分子的表达水平,并探讨抗PD-L1单抗和EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)干预对EGFR敏感突变肺癌细胞及共培养体系中T淋巴细胞的影响。方法:1、采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺腺癌EGFR敏感突变患者22例(腺癌突变组)、肺腺癌EGFR野生型患者18例(腺癌野生组)、肺鳞癌患者28例(鳞癌组)及健康志愿者50例(对照组)sPD-L1表达水平;分析晚期肺腺癌sPD-L1与临床病理特征的关系。2、采用流式细胞术(FCM)及ELISA检测厄洛替尼干预前后EGFR突变及野生型肺癌细胞株表面膜型PD-L1(mPD-L1)的表达及培养上清中sPD-L1的水平。3、建立肺癌细胞与T细胞共培养体系,采用抗PD-L1单抗、厄洛替尼单独及联合对体系内肿瘤细胞和T淋巴细胞进行干预,用CCK-8法研究共培养体系中T淋巴细胞增殖的影响,ELISA法测定细胞上清IFN-γ的含量观察T淋巴细胞功能变化,并用流式细胞术检测厄洛替尼干预后对共培养体系中肿瘤细胞表面PD-L1的表达及T淋巴细胞凋亡的影响。结果:1、肺腺癌组和肺鳞癌组sPD-L1分子表达水平均高于对照组(P<0.01、P<0.01);肺腺癌突变组和肺腺癌野生组相比sPD-L1分子表达差异无统计学意义(P>0.05);晚期肺腺癌患者sPD-L1表达的高低与吸烟史及肿瘤的转移密切相关(P<0.05);与患者性别、年龄及分期均无明显相关性(P>0.05)。2、EGFR突变型细胞株(PC9、HCC827)高表达PD-L1,而EGFR野生型细胞株(H1299、A549)低表达PD-L1;厄洛替尼干预后EGFR突变细胞株mPD-L1表达水平分别均出现下调(均P<0.05),培养上清中sPD-L1明显降低(均P<0.01);而EGFR野生型细胞株上述变化均无显著统计学意义。3、在肺癌细胞株和T淋巴细胞共培养体系中,采用厄洛替尼干预可促进与EGFR突变型细胞共培养体系中T淋巴细胞增殖并抑制其凋亡(均P<0.01);与厄洛替尼干预组相比,厄洛替尼联合抗PD-L1单抗干预组可进一步促进T淋巴细胞增殖并抑制其凋亡(均P<0.05);在EGFR野生型细胞共培养体系中,厄洛替尼干预对T淋巴细胞增殖差异无统计学意义(均P>0.05)。抗PD-L1单抗与厄洛替尼联合干预对T淋巴细胞增殖亦无明显进一步促进作用(均P>0.05)。厄洛替尼干预可使EGFR突变细胞HCC827与T淋巴细胞共培养体系中IFN-γ分泌明显增高(P<0.01),HCC827细胞表面PD-L1出现明显下调(P<0.001),而EGFR野生型细胞株A549上述变化均无显著统计学意义。结论:1、晚期临床肺腺癌患者血清中sPD-L1表达的高低与吸烟史及肿瘤的转移有关,与EGFR敏感突变无明显相关性。2、与EGFR野生型细胞株相比,厄洛替尼干预后,EGFR突变型细胞株sPD-L1出现下调,提示EGFR信号通路可以调控的PD-L1表达。3、应用厄洛替尼干预,EGFR敏感突变的肿瘤HCC827细胞与T淋巴细胞共培养上清测得IFN-γ出现明显上升,提示在EGFR敏感突变的肿瘤中EGFR-TKIs可促进T淋巴细胞对肿瘤的免疫杀伤。4、厄洛替尼联合抗PD-L1单抗干预EGFR突变型细胞与T细胞共培养体系,可进一步促进体系中T细胞增殖并抑制其凋亡,且使T细胞分泌IFN-γ明显增高,提示联合应用抗PD-L1单抗及EGFR-TKI可能有效提高机体对抗EGFR敏感突变非小细胞肺癌的能力。