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目的:烯醇磷酸酶1(ENOPH1)是一种通过甲硫氨酸补救途径参与多胺生物合成的酶,ENOPH1与焦虑抑郁、脑缺血等应激反应密切相关,但关于ENOPH1在肿瘤组织中的报道知之甚少,本研究的目的是初步探讨ENOPH1在脑胶质瘤增殖和迁移过程中的作用及机制。方法:本研究采用临床胶质瘤样本和胶质瘤细胞系从体内外层面分别观察ENOPH1在人胶质瘤组织和细胞系中的表达及功能。①采用蛋白印迹、实时定量荧光PCR和免疫组织化学染色方法,对临床患者胶质瘤组织和正常脑组织中ENOPH1基因和蛋白的表达水平进行测定;②体外研究中,采用2种恶性胶质瘤细胞(U87细胞系和U251细胞系),利用蛋白印迹、实时定量荧光PCR和免疫组织化学染色方法,观察ENOPH1在胶质瘤细胞系中的基因和蛋白表达水平;③利用基因转染ENOPH1 siRNA敲低胶质瘤细胞内ENOPH1的表达水平,使用3-[4,5-二甲基噻挫-2-yl]-2,5二苯四唑胺(MTT)方法检测ENOPH1 siRNA转染组和对照组细胞的存活率,来观察敲减ENOPH1对于脑胶质瘤细胞存活的影响;④采用细胞划痕实验观察敲除ENOPH1后对脑胶质瘤细胞迁移的影响;⑤通过流式细胞术检测各时期细胞的百分比及Western blot检测细胞周期蛋白的表达,分析敲低ENOPH1对于胶质瘤细胞增殖的影响;⑥利用Western blot方法检测敲低ENOPH1对其下游分子ADI1的细胞内定位和蛋白表达以及MT1-MMP的蛋白表达的影响。结果:①神经胶质瘤组织与正常脑组织相比,ENOPH1蛋白和基因转录水平显著升高,而且ENOPH1的表达水平与胶质瘤病理分级呈正相关;②ENOPH1基因和蛋白在恶性胶质瘤细胞(U87细胞系和U251细胞细胞系)中呈现高表达;③用基因操控技术转染ENOPH1 siRNA敲减ENOPH1表达后,不仅显著降低胶质瘤细胞的增殖,而且明显抑制胶质瘤细胞的迁移;④敲除ENOPH1促进了它的下游蛋白ADI1从细胞核转移到细胞质中,而MT1-MMP的表达与对照组相比明显下降,提示ENOPH1可能通过ADI1影响下游MT1-MMP的表达从而参与胶质瘤的发生发展。结论:我们的研究结果表明,敲除ENOPH1能够明显抑制胶质瘤细胞增殖和迁移,这可能与神经胶质瘤细胞的ADI1易位和MT1-MMP的下调有关,因此提示ENOPH1可能是胶质瘤的潜在治疗新靶点。