舌鳞状细胞癌(Tca8113)对卡铂耐药过程中ERCC1的表达

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目的:探讨人舌鳞状细胞癌Tca8113对卡铂耐药过程中,ERCC1的表达与癌细胞耐药的关系;探讨两种不同卡铂用药方式对人舌鳞状细胞癌Tca8113耐药性的影响。方法:1.采用逐步递增法将不同浓度卡铂体外作用于Tca8113,设置1个对照组和筛选出6个不同程度耐药组,采用MTT法检测每组细胞的IC50(半数抑制浓度),RT-PCR和Western blot方法检测每组细胞ERCC1在mRNA及蛋白质水平的表达。2.用免疫组化法检测化疗前后口腔鳞癌患者癌组织中ERCC1的表达。3.将Tca8113细胞株随机设置1个对照组、6个不同程度的耐药组和1个大剂量冲击用药组,然后加入相应浓度卡铂体外刺激。用MTT法检测每组细胞的IC50值, RT-PCR法检测每组细胞ERCC1mRNA的表达。结果:1.随着耐药性的增加,各组细胞ERCC1在mRNA及蛋白质水平的表达也增加,各组细胞IC50值与RT-PCR条带灰度值呈正相关(r=0.91,P<0.01),与western blot条带灰度值亦呈正相关(r=0.88,P<0.01)。2.化疗前后口腔鳞癌患者癌组织中ERCC1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。3.大剂量冲击用药组细胞IC50值和ERCC1mRNA水平界于小剂量逐步耐药法的较小组和较大组之间,且有统计学差异(P<0.05)。结论:1.ERCC1的高表达可能为Tca8113对卡铂耐药的一个标志,为逆转耐药提供了一个可能的作用靶点。2.从各组的IC50值和ERCC1mRNA表达水平等耐药性指标的角度证实了大剂量冲击用药法优于小剂量逐步多次用药法。
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