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目的：结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是我国常见的消化道恶性肿瘤,且发病率呈现上升趋势。由于CRC患者早期症状不典型,就诊时多处于中晚期。虽然结直肠癌的外科、化学治疗方面近年来有了很大的进步,其总的5年生存率仅为50%-60%。早期诊断并接受有效的治疗仍是提高CRC患者生存率的重要手段。而传统的检测方法,如粪便潜血检查(fecal occult blood testing, FOBT)、肠镜检查等都存在各自的缺陷,导致CRC的早期诊断率并不高。自Cho KR.等人提出结直肠癌发生发展过程中一些基因的改变后,分子生物学技术在结直肠癌诊断中的应用就成为了人们研究的热点。本文就是研究CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1及MS4A1在结直肠癌患者外周全血中的表达变化情况,并将由上述5基因组成的生物标记物模板与传统的消化道肿瘤的检测方法一癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)进行检测效用对比,从而验证这种新的基因组合作为结直肠癌检测手段的可行性。方法：1.抽取患者静脉血,从中提取总RNA,选用ACTB作为内参基因,针对CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1及MS4A1 mRNA设计引物,RT-PCR扩增目标片段。2.在荧光定量PCR仪分别进行PCR反应,得到扩增标准曲线并验证该方法的灵敏性和可重复性,同时验证CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1及MS4A1的扩增效率是否一致。3.研究对象：我科2006年6月至2007年6月期间收治的结直肠癌患者外周静脉血样本30份,其中包括结肠癌患者18例,直肠癌12例,所有结、直肠癌患者均经术后病理学诊断证实。抽取血液样本前病人均未接受放疗、化疗、生物治疗及其他治疗。后随机抽取30例“相对健康患者”的外周静脉血样本作为对照。4.提取CRC及对照组患者外周血液标本,提取总RNA,逆转录为cDNA进行实时荧光定量PCR反应。为排除RNA浓度对扩增效率的影响,CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1及MS4A1表达水平采用相对表达量来表示,即采用2△CT值来表示上述五基因的相对表达量,并分析其表达水平与CRC病理类型及病理分期的关系。5.利用SPSS17.0软件统计分析数据。两组计量资料间分布比较用Mann-Whitney U test,率的比较采用x2检验。所有检验以P<0.05为显著统计学差异标准,双侧检验。结果：1.利用Trizol法提取总RNA,经甲醛变性琼脂凝胶电泳鉴定,可见28S和18S明显的2条条带,证明抽提的RNA质量完好,无DNA污染。RT-PCR扩增后终产物经2%琼脂糖凝胶电泳,在紫外线灯下观察,可见到与目的片段大小一致109bp(CDA)、146bp(MGC20553)、147bp(BANK1)、119bp(BCNP1)、106bp(MS4A1)的电泳条带。2.30例结直肠癌患者中有21例可以同时检测到CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1、MS4A1的表达。3. CDA、MGC20553在结直肠癌病人全血中呈高水平表达：BANK1、BCNP1、MS4A1在结直肠癌病人全血中低水平表达,P<0.05。4.在结直肠癌患者全血中,CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1、MS4A1的表达水平与病理分级、病理类型、浸润程度无明显相关性,P>0.05。5.30例结直肠癌患者中有14例CEA检测呈阳性(CEA≧5.0ng/ml)。结论：1.结直肠癌病人全血中确实存在CDA、MGC20553的高水平表达和BANK1、BCNP1、MS4A1的低水平表达。2. CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1及MS4A1在结直肠癌病人中的表达与肿瘤的组织学分型及肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移情况等无明显相关性。3.将CDA、MGC20553、BANK1、BCNP1、MS4A1作为一个基因组合用来检测结直肠癌的阳性率要高于CEA,且敏感性明显高于基于粪便的检测方法。