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目的：研究胃癌患者体内TIL细胞和CIK细胞激活前后细胞表型的差异，同时观察两种细胞激活前后对人胃癌BGC-823细胞的免疫杀伤效应差别，从而为临床开展胃肠肿瘤免疫细胞治疗筛选优选免疫细胞提供理论依据。
方法：取胃癌患者手术切除标本经机械和酶消化法联合分离提取TIL细胞和肿瘤组织单细胞悬液得到初始TIL细胞，经细胞因子IL-2共培养诱导后得到激活的TIL细胞；抽取患者外周血15ml经密度梯度离心得到初始CIK细胞，经细胞因子IL-2、IFN-γ和单科隆抗体CD3共培养诱导后得到激活CIK细胞；应用流式细胞术(FCM)测定初始TIL细胞和CIK细胞激活前后细胞表型(CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD25+)变化及差异，用CD4+/CD25+双阳性抗体标记肿瘤组织和正常组织外周血淋巴细胞，分别检测其CD4+CD25+Treg细胞的含量：以胃癌BGC-823细胞作为靶细胞(效靶比=20:1)观察初始TIL细胞和CIK细胞与激活后TIL细胞和CIK细胞对细胞株细胞的肿瘤杀伤效应差异。
结果：
1.激活前后TIL细胞流式检测结果：初始TIL细胞表面CD3+、CD4+、CD8+、CD25+表达量分别为：(58.20±1.37)％、(32.82±0.97)％、(30.21±2.29)％、0％；激活后TIL细胞表面CD3+、CD4+、CD8+、CD25+表达量分别为：(70.83±1.13)％、(44.32±0.715)％、(55.10±1.19)％、(19.68±1.28)％；激活前后TIL细胞表型变化显著，激活后其细胞表面CD3+、CD4+、CD8+、CD25+表达明显增高，有统计学差异(tCD3+=7.106；tCD4+=9.534；tCD8+=9.633)。
2.激活前后CIK细胞流式检测结果：初始CIK细胞表面CD3+、CD4+、CD8+、CD56+表达量分别为：(43.77±2.30)％、(34.58±1.39)％、(23.43±1.80)％、(4.34±0.33)％；激活扩后CIK细胞表面CD3+、CD4+、CD8+、CD56+表达量分别为：(57.90±2.85)％、 (19.33±1.09)％、(63.02±2.21)％、(27.21±1.78)％；激活前后CIK细胞表型变化显著，激活后其细胞表面CD3+、CD8+、CD56+表达明显增高，CD4+表达下降，差异有统计学差异(tCD3+=3.858；tCD4+=8.621；tCD8+=13.88；tCD56+=12.7)。
3.肿瘤组织中CD4+CD25+Treg细胞含量：肿瘤组织周围CD4+CD25+Treg细胞的含量为(8.51+0.37)％，明显高于正常组织中细胞含量(3.20±0.22)％，统计学差异显著(t=12.44)。
4.胃癌患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞含量：胃癌患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞含量为(10.20±0.27)％明显高于正常对照组(6.02±0.25)％，统计学差异显著(t=11.46)。
5.激活前后TIL细胞对BGC-823胃癌细胞的杀伤率：初始TIL细胞和激活后TIL细胞对BGC-823胃癌细胞都有杀伤作用，杀伤效率分别为(18.36±2.60)％和(37.71±2.77)％；激活后TIL细胞杀伤效率明显高于初始TIL细胞(t=5.096)。
6.激活前后CIK细胞对BGC-823胃癌细胞的杀伤率：初始CIK细胞和激活后CIK细胞对BGC-823胃癌细胞都有杀伤作用，杀伤效率分别为(16.65±2.85)％和(53.17±3.55)％：激活后CIK细胞杀伤效率明显高于初始CIK细胞(t=8.021)。
7.激活的TIL细胞和CIK细胞对BGC-823胃癌细胞的杀伤率比较：两种细胞经体外活化扩增后对BGC-823胃癌细胞都有较高的杀伤效应，其杀伤率分别为：(37.71±2.77)％和(53.17±3.55)％。两者比较，激活后的CIK细胞对胃癌细胞的杀伤率明显高于激活后的TIL细胞，统计学差异显著(t=3.435)。
结论：
1.胃癌患者肿瘤周围存在以CD3+、CD4+、CD8+细胞表型为主的TTL细胞，该细胞群在体外经诱导后能够被活化并大量扩增。
2.胃癌患者体内初始TIL细胞对肿瘤细胞有杀伤作用，但其功能受到抑制，在体外经IL-2诱导活化后能够恢复免疫效应功能，杀伤作用明显增强。
3.胃癌患者外周血中存在少量以CD3+、CD56+、CD8+细胞表型为主的CIK细胞，该细胞群在体外能够被细胞因子诱导活化后能明显扩增。
4.胃癌患者体内初始CIK细胞对肿瘤细胞杀伤作用有限，但该细胞群在体外经过IL-2及细胞因子诱导活化后产生强大的免疫效应功能，对人胃癌细胞株产生明显杀伤作用。
5.CIK细胞体外对人胃癌细胞株的杀伤作用明显高于活化后的TIL细胞。
6.胃癌患者肿瘤组织及外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞含量明显增高，可能与TIL细胞和CIK细胞功能受抑制有密切关系，通过对Treg细胞的调控可能会明显提高免疫细胞的特异性杀伤作用，从而提高免疫治疗疗效。