宫颈癌是全球最常见的妇科恶性肿瘤之一，其死亡率是女性肿瘤的第二位，全世界每年有近50万新发病例，其中超过半数病例因此而死亡。近年资料显示宫颈腺癌的发病率在逐年升高，尤其是在年轻妇女其发病率可达20％。宫颈腺癌的临床及分子生物学特性有别于宫颈鳞癌，其患者的五年生存率较宫颈鳞癌患者低，预后差，因此对宫颈癌特别是对宫颈腺癌的研究具有重要意义。 从流行病学上看，导致宫颈癌的病因是多方面的，如HPV感染，抑癌基因和癌基因的平衡失调，细胞凋亡机制的抑制等。其中肿瘤细胞的凋亡是当前肿瘤研究的热点。作为最近发现的凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisproteins，IAP)家族最重要的成员survivin，因其具有以下四方面的特点不同于家族其他成员而倍受关注。(1)独特的结构特点：IAP家族其他成员的结构中均存在2到3个串联的含有半胱氨酸/组氨酸的杆状病毒IAP重复区(BIR)，相邻的羧基末端有一个环指结构，而survivin却只包含一个氨基端Zn2+结合的BIR结构，无环指结构，由一个40个氨基酸组成的α螺旋结构取代。此螺旋结构富含疏水基团，能与细胞纺锤体上的微管结合，为survivin抗凋亡根本之所在，无此结构的变异体就无抑制凋亡的功能。(2)特殊的组织分布：只在胚胎及胎儿期和几乎所有的肿瘤表达，而在成年人正常组织无表达或低表达。(3)明显的抗凋亡作用。(4)具有利用survivin反义寡核苷酸、survivin突变体进行的基因治疗、免疫治疗等多方面的治疗价值。因此研究survivin在宫颈癌中的表达具有一定的前沿性和实用性。 研究内容：(1)survivin在宫颈癌与慢性宫颈炎组织中表达的检测;(2)宫颈鳞癌和宫颈腺癌survivin表达的检测，此前，尚未见到有足够样本数量的survivin在宫颈鳞癌和宫颈腺癌表达对比及相关临床意义的报道;(3)分析survivin在宫颈癌中的表达与临床病理特征的相互关系，找出与预后相关的指标;(4)分析了survivin胞核强阳性表达与宫颈癌病理类型、淋巴转移、肿瘤大小间的相关性，提出了survivin胞核强阳性表达可能与肿瘤细胞的增殖、分裂活性较survivin阳性表达相关性更加密切，它可反映肿瘤细胞生物学特性，预示不良预后的新观点。 资料：选择1997年～2004年间山东肿瘤医院病理科经活检和手术切除宫颈癌组织蜡块标本60例，慢性宫颈炎10例，所有病例均为病理诊断确诊(根据Maier和Norris提出的诊断标准确定宫颈原发腺癌)且患者具有完整病理资料。每个蜡块标本连续4um切片，留1张行HE染色用做组织学分类，另备6μm切片用于此项研究之后的PCR与survivin在宫颈癌表达相关性的研究之用。设已知阳性对照及阴性对照，所有切片采用同批试剂检测。随访方式为电话、信访及门诊定期复查方式进行。在60例宫颈癌患者中腺癌30例(腺癌16例，腺鳞癌5例，透明细胞癌7例，子宫内膜样腺癌2例。)鳞癌30例。年龄(26～67)岁，平均48.3岁。大于48岁的有36例，小于48岁的有24例。病理分级：G1级26例，G2～G3级34例。根据1995年再次修订后的国际妇产科联盟(FIGO)提出的分期标准进行临床分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期33例，Ⅲ～Ⅳ期15例。手术60例，行放疗42例，有淋巴结转移的24例，无淋巴结转移的36例。 实验方法：该组实验方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接免疫组化方法(SP法)，羊抗人survivin单克隆抗体及SP试剂盒均为福州迈新生物技术开发有限公司产品，操作步骤按说明书进行，设阳性对照及阴性对照。所有切片采用同批试剂检测，随访方式为电话、信访及门诊定期复查方式进行。 免疫组化结果判定：在组织切片中显示胞质或胞核染成淡黄色至棕黄色者为阳性细胞标志，记录胞核的阳性数量和比例及程度。参照Lgaws等方法，每张切片在400倍显微镜下顺序找5～10个视野，每个视野数100～200个细胞共计1000个细胞，计算每张切片上阳性细胞表达的百分数及胞质、胞核的阳性细胞表达的百分数。将阳性细胞数按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数＜10％，显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色；表达强阳性(+++)，即阳性细胞数＞60％，多数细胞呈黄至棕黄色；表达中度阳性(++)，即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性与强阳性之间。若阳性细胞少，但着色较强相应增加一级，阳性结果有两位以上的观察者观察，凡显色强度上背景无明显差别者为阴性。统计学方法：采用χ2检验。 结果： 1.Survivin基因在慢性宫颈炎与宫颈癌中的阳性表达Survivin基因在慢性宫颈炎组织中的表达10例中只有1例阳性，9例阴性(1/10)，明显低于survivin宫颈腺癌中的表达80％(24/30)及宫颈鳞癌中的表达56.67％(17/30)，差异显著(P＜0.01)。 2.Survivin基因在宫颈鳞癌与宫颈腺癌中的阳性表达Survivin在宫颈鳞癌中的阳性表达为56.67％(17/30)，在宫颈腺癌中的阳性衷达为80％(24/30)，差异显著(p＜0.05)。 3.宫颈鳞癌、宫颈腺癌中survivin基因表达与临床病理相关性Survivin基因的阳性表达与患者的年龄、肿瘤的大小、病理分级、临床分期无相关性(P＞0.05)，但与患者的病理分类有关，survivin在宫颈腺癌中呈现高表达，在其中四种病理分型中，又以腺癌为最高(15/16)(p＜0.05)、与淋巴结转移有关(p＜0.01)。 4.Survivin胞核强阳性表达与临床病理相关性我们在survivin阳性表达中注意到(1)Survivin不仅在胞质中定位表达，而且还在胞核中定位表达。(2)survivin胞核强阳性表达与病理类型相关，在腺癌的表达为最高，以宫颈腺癌中的腺癌类型为最高(11/16)，差异显著(p＜0.05)。(3)survivin阳性表达与肿瘤大小无关，但survivin胞核强阳性表达肿瘤大小相关，差异显著(p＜0.05)。(4)Survivin胞核强阳性表达与有无淋巴结转移密切相关(p＜0.01)。 结论： 1.Survivin在宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于在慢性宫颈炎的阳性表达率，说明survivin可能通过抑制宫颈癌细胞的凋亡，促进宫颈癌细胞的增殖及血管形成等方式，在宫颈癌的发生发展中起作用。研究验证了survivin只特异性表达于肿瘤组织，而在成人正常组织中不表达或低表达的特性。 2.Survivin在宫颈腺癌的阳性表达率高于宫颈鳞癌的阳性表达，差异显著。宫颈鳞癌和宫颈腺癌各30例的survivin的阳性表达检测对比，是具有一定样本资料的检测结果。与Yoshida等用免疫组化法检测宫颈鳞癌、宫颈腺癌各17例的survivin的阳性表达结果相符。Survivin的阳性表达具有的意义，与宫颈腺癌具有预后差、易复发、对放化疗不敏感等特性相吻合，说明其中有一定的内在联系，其机理有待于进一步的研究探索。 3.Survivin阳性表达在肿瘤细胞病理分类、淋巴结转移等方面有相关性，而与肿瘤的大小、病理分级、年龄无关，说明survivin阳性表达在宫颈癌的发生、发展预后中具有显著相关性。 4.Survivin胞核强阳性表达与宫颈癌肿瘤的大小、淋巴结转移情况及宫颈癌病理类型有关，还可能与患者的平均生存率呈负相关。上述临床特性应取决于survivin在细胞中的表达具有严格的细胞周期依赖性及survivin在有丝分裂过程中不同时期的分布定位等特性，Survivin胞核强阳性表达说明其细胞增殖、分裂活跃。 Survivin阳性表达特别是survivin胞核强阳性表达可成为宫颈癌早期诊断、早期治疗、评价疗效与预后的有价值的检测指标，survivin胞核强阳性表达可能与宫颈癌临床病理的联系更加密切，这是研究中的新发现。