论文部分内容阅读
目的本实验采用改良的双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆大鼠模型，观察迷迭香吸嗅后血管性痴呆大鼠学习记忆功能的改善情况；并通过免疫组化法检测迷迭香吸嗅后实验大鼠海马内5-HT和GABA含量的变化情况，初步探讨迷迭香吸入的作用机制及临床应用价值。方法1. VD大鼠模型制备：将健康的SD大鼠用改良的2VO法造成VD模型，即先结扎左侧颈总动脉，1周后用同样的方法结扎右侧颈总动脉。2.模型大鼠水迷宫筛查：手术后4周时，初步筛选并存活的模型大鼠16只，正常大鼠和假手术大鼠各8只。通过Morris水迷宫测定24只大鼠的空间学习记忆成绩，记录定位航行实验中大鼠找到安全平台的时间（即逃避潜伏期）和空间探索实验中大鼠穿越原平台所在位置的次数（即穿台次数）为实验指标，时间均以120s为限。3.分组及给药：将造模成功的大鼠随机分为模型组和迷迭香组，另设正常组和假手术组对照。（1）迷迭香组（n=8）:每天上、下午分别予以1%浓度的迷迭香吸嗅，每次30min；（2）VD模型组（n=8）：使用蒸馏水替迷迭香精油，其他同迷迭香组；（3）假手术组（n=8）：假手术组分离出2侧颈总动脉但不予结扎，余实验步骤同VD模型组；（4）正常组（n=8）：不做任何手术处理，余实验步骤同模型组。4.神经行为学和形态学观察①在用药后5周时，再次使用Morris水迷宫测定大鼠的空间学习记忆成绩，水迷宫实验的方法同前。②在神经行为学实验结束后，将全部大鼠断头取脑，制作石蜡切片，进行HE染色观察大鼠海马区的病理形态学变化，再用免疫组化法观察大鼠海马区5-HT和GABA含量的变化情况。结果1.术后4周时，手术组的逃避潜伏期明显长于正常组，差异有统计学意义(P<0.05)；穿台次数显著少于正常组,差异有显著统计学意义（P<0.05）；假手术组和正常组相比，潜伏期与穿台次数均无明显差异（P＞0.05）。2.用药5周时，迷迭香吸嗅组的逃避潜伏期短于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)；穿台次数显著多于模型组（P<0.05）。模型组大鼠的逃避潜伏期明显长于正常组,差异有显著统计学意义（P<0.05）；穿台次数显著少于正常组,差异有显著统计学意义（P<0.05）。3.免疫组化结果中，模型组的5-HT和GABA的阳性神经元较正常组明显减少（P<0.05），与模型组比较，迷迭香吸嗅组的阳性神经元数明显增多（P<0.05）。结论1.改良的2VO法建立大鼠VD模型，对大鼠脑组织损伤较小且会出现明显的学习记忆障碍，符合VD临床的特点。2.迷迭香吸嗅对VD大鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用。3.迷迭香改善VD模型大鼠的学习记忆能力可能与增加海马内5-HT和GABA的含量有关。