【摘 要】
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兰科石斛属植物兜唇石斛(Dendrobium aphyllum)和齿瓣石斛(D.devonianum)均为传统中药材,有着极高的药用价值。近年来由于人为过度采集,在西双版纳地区石斛资源遭到严重破坏。对2
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兰科石斛属植物兜唇石斛(Dendrobium aphyllum)和齿瓣石斛(D.devonianum)均为传统中药材,有着极高的药用价值。近年来由于人为过度采集,在西双版纳地区石斛资源遭到严重破坏。对2种石斛开展综合保护及相关研究已刻不容缓。在自然条件下,兰科植物种子需要与特定的真菌共生才能顺利萌发,研究兰科植物共生真菌对其有效保护有着极为重要的意义。本研究从齿瓣石斛种子原地萌发所获得的原球茎中分离得到内生真菌,在燕麦培养基以及人工混合基质等不同培养条件下,研究不同真菌、光照及培养时间对2种石斛种子萌发、原球茎发育和幼苗形成的作用,探讨不同培养条件下2种石斛共生真菌的专一性,为进一步开展2种石斛种子共生萌发高效种苗繁育研究奠定基础。具体结果如下: 1、从齿瓣石斛原生地自然萌发的原球茎中分离得到编号为FDd1的内生真菌菌株,经分子鉴定为瘤菌根菌属(Epulorhiza)真菌。 2、通过对比接种实验,在燕麦培养基上进行了齿瓣石斛种子的共生萌发,筛选出3种对2种石斛种子萌发有明显促进作用的菌根真菌:从齿瓣石斛原球茎所分离得到的FDd1菌株(瘤菌根菌属),从兜唇石斛原球茎中分离得到的FDaI7菌株(胶膜菌属)和从硬叶兰原球茎中分离得到的FCb4菌株(瘤菌根菌属),均能在萌发早期促进齿瓣石斛种子在燕麦培养基上共生萌发形成原球茎。 3、首次在人工混合基质上对兜唇石斛和齿瓣石斛分别开展的种子共生萌发实验,发现不同培养条件下共生萌发真菌表现出一定的专一性差异:从兜唇石斛原球茎中分离得到的FDaI7菌株(胶膜菌属)和从齿瓣石斛原球茎中分离得到的FDd1菌株(瘤菌根菌属),分别能够有效促进兜唇石斛和齿瓣石斛种子的共生萌发及后续生长;而从硬叶兰原球茎中分离得到的FCb4菌株,同为瘤菌根菌属真菌,却对2种石斛的基质共生萌发均无任何效用。光照对种子萌发和原球茎形成有重要影响;而恒定温度培养对于石斛种子萌发有着一定程度的促进作用。 4、对兜唇石斛和齿瓣石斛在人工基质上种子共生萌发过程进行连续动态监测,结果显示:齿瓣石斛较兜唇石斛需要更短的时间从种子发育为幼苗,且在齿瓣石斛种子萌发为原球茎的过程中,提供短期的黑暗条件能使得原球茎尽早发育,这表明黑暗条件可能有利于齿瓣石斛原球茎初期发育。然而2种石斛原球茎和幼苗的进一步发育均需要光照来促进。尽管特定时期内的黑暗条件可能对兰科植物种子的发育有一定的重要意义,然而黑暗培养条件下,更适宜真菌生长,长时间黑暗条件培养同样不利于石斛种苗的扩繁。
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