产胞外多糖PS04菌株发酵条件优化及多糖结构分析

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianjinajun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
从土样中分离出一株胞外多糖产生菌株PS04,具有高产胞外多糖的能力。为了探明该菌的特征及多糖性质,本论文从该菌株的分类鉴定、胞外多糖的提取纯化、多糖结构和粘度性质的分析与鉴定以及该菌发酵PS04多糖的工艺条件优化几方面展开了研究,主要研究内容和结果如下:   (1)对PS04菌株进行分类鉴定,通过16SrDNA序列分析,结果表明,PS04菌株与GenBank登陆号为AY302439的Paenibacillus polymyxa WY110序列相似程度较高,达到98%以上,在系统发育树上处在同一分支,结合形态和生理生化鉴定,确定菌株PS04为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。   (2)采用95%乙醇、异丙醇、甲醇、丙酮等四种有机溶剂沉淀法提取PS04多糖,结果表明:丙酮、异丙醇、95%乙醇的提取效果较好,但三者差异不显著,故选择95%乙醇为最佳提取溶剂;对不同用量95%乙醇提取多糖效果进行比较,认为V乙醇:V发醇液为3:1与4:1时提取效果较好,本着节约成本的角度,确定溶剂比3:1为最佳溶剂用量。   (3)对PS04多糖粘度性质研究发现,该多糖溶液属于假塑性非牛顿型流体;其粘度性质与黄原胶相近,具有低浓度高黏性的特征,且粘度随浓度增加而升高;该多糖溶液对酸碱、温度稳定性好,对盐离子具有一定的耐受性。   (4)采用丙烯葡聚糖凝胶S-200HR对精制多糖进行过滤层析,得到单一组分峰:紫外扫描表明该多糖溶液在260nm与280nm波长处均无显著吸收峰,说明纯化过的PS04多糖不含蛋白质、核酸等杂质;采用凝胶渗透色谱法分析测定,可知PS04多糖重均分子量为4009KDa,峰位分子量为3174KDa,分布宽度指数为1.348;通过红外光谱分析,证明其为典型的多糖化合物;采用高效液相色谱法对其单糖组分进行鉴定,发现该多糖主要成分为果糖和葡萄糖,且比例为7:1;利用核磁共振技术对多糖结构分析发现,该多糖糖残基为呋喃型果糖,以β-2,6、β-2,1键连接。   (5)对PS04多糖进行发酵工艺研究,其单因素实验结果表明,摇瓶发酵最佳碳源为蔗糖,氮源为NH4NO3,温度为37℃、初始pH为6.0、接种量为4%、装液系数为0.4,Mg2+与Fe2+共同添加有利于多糖的合成,其中氮源、碳源及pH为影响PS04多糖发酵的主要因素;进一步采用响应面设计对发酵工艺进行优化,得到PS04多糖发酵的最佳工艺条件为:蔗糖浓度154.44g/L、NH4NO3浓度1.06g/L、初始pH值为8.22,在此条件下发酵48h,多糖产量可达到60.037g/L;采用5L发酵罐,以摇瓶发酵最优条件进行初步发酵放大试验,PS04多糖产量为55g/L左右。
其他文献
门座起重机是一种重要而又具有代表性的旋转类型的有轨运行式起重机,广泛应用于港口、码头货物的机械化装卸,是实现生产过程机械化不可或缺的重要设备。四连杆结构是门座起重机的核心机构,负责起重机的起升和变幅运动。为了保证吊重沿水平线或接近水平线方向移动,变幅机构的设计多采用组合臂架补偿法,即采用组合臂架补偿法对四连杆的结构参数选择进行优化。本文在浙江大学与上海港机重工有限公司的合作项目“门座起重机四连杆结
作为一种具有纳米线形貌下微骨架结构的一维纳米材料,碳纳米管(CNTs)以其优异的力学、电学、热学等性能吸引了国内外学者的广泛关注与研究。但随着科技的发展与研究的深入,发现碳
本文旨在探索出一条计算流体力学与科学可视化相结合的新出路,利用可不断扩充的VTK可视化软件包,开发出一种新的模拟数据的后处理方法,克服传统的后处理工具的一些弊端。本文
本文基于Solid Edge V16版本,用Visual Basic 6.0开发了一套加热炉余热锅炉受热面的三维设计软件。本软件有针对性强,建模效率高,易学易用等特点,可以在Solid Edge交互环境下
在新时代的大背景中,基层党组织会面临新的状况和问题,为了贯彻十九大提出的新要求和新举措,基层更要做好自身的本质工作.本文从政治、思想、作风、纪律及组织建设上进行深入
新媒体的出现和普及为高校党建工作带来新的机遇与挑战,本文从探析新媒体技术的特点出发,讨论新媒体的运用对高校党建教育带来的影响和挑战,并结合实际工作提出顺应时代发展
随着现代信息技术的发展,我国已经进入到信息化时代.在信息化时代,高校大学生的思想政治教育工作面临着极大的挑战,同时也面临着新的机遇.文章就当前大学生网络思想政治教育
随着信息时代的到来,高校图书管理工作也发生了巨大变化,传统的管理模式已经不适用,不利于高校图书管理工作的有效开展.对此,管理者要认清当前形势,改革图书管理工作.本文就
随着世界能源形势的日趋严峻,太阳能热发电作为一种重要的可再生能源发电方式,受到了各国政府的青睐。聚光器的跟踪控制是太阳能热发电系统中的一项关键技术,采用跟踪系统可
随着数字媒体科技的发展和进步,数字媒体艺术设计产业是现阶段当之无愧的朝阳产业.虽然我国的数字媒体艺术设计产业才刚刚崭露头角,但是其发展前景比较可观.因此,应该理性看