怀牛膝对通塞脉微丸主要活性成分药动学与组织分布的影响

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本论文主要由文献研究和实验研究两部分组成。在文献研究中,主要从“中药归经理论的文献与实验研究方法探讨”和“通塞脉方中各药材的化学成分研究进展”两部分展开综述。“中药归经理论的文献与实验研究方法探讨”对中药归经的现代研究方法进行分析、归纳、总结和探讨,认为中药归经理论应该结合中药的作用机制,同时利用现代技术手段进行深入、系统的研究;“通塞脉方中各药材的化学成分研究进展”主要对方中每味药材的化学成分及相关药理作用进行总结,为本课题中的定性分析,定量研究,以及药动学和组织分布的化学成分分析研究奠定物质基础。在实验研究中,本论文主要从“加减怀牛膝对通塞脉微丸体外化学成分的影响研究”、“加减怀牛膝对通塞脉微丸体内血浆中化学成分的影响研究”、“加减怀牛膝对通塞脉微丸主要活性成分体内药动学影响研究”和“加减怀牛膝对通塞脉微丸主要活性成分组织分布的影响研究”四个方面展开研究:在“加减怀牛膝对通塞脉微丸体外化学成分的影响研究”中,采用了超高效液相色谱-高分辨率质谱联用技术,根据质谱提供的精确分子量信息以及多级质谱裂解信息从而鉴定出通塞脉微丸中的化学成分。同时建立了测定通塞脉微丸10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱分析方法,比较加减怀牛膝对通塞脉微丸10种有效成分含量差异的影响。结果表明所建立的方法准确、快捷,重现性好,可用于通塞脉微丸10种有效成分的含量测定,加、减怀牛膝对通塞脉微丸中代表活性成分的含量无显著性影响。在“加减怀牛膝对通塞脉微丸体内血浆中化学成分的影响研究”中,采用超高效液相色谱-高分辨率质谱联用技术,鉴定出含药血浆中的入血化学成分。在去牛膝组含药血浆中共解析到39个化合物,在加牛膝组含药血浆中共解析到30个化合物的。对两组间相互差异的各成分进行文献查阅分析,发现这些成分目前暂未报道与治疗缺血性脑中风有相关的药效治疗作用。因此,初步分析表明,加减怀牛膝对大鼠含药血浆中化学成分无显著性影响作用。在“加减怀牛膝对通塞脉微丸主要活性成分体内药动学影响研究”中,建立了UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中4种成分的分析方法,结果表明,减牛膝组4种成分的Cmax值和AUC(0-∞)值均比加牛膝组高,其中绿原酸的Cmax值差异显著(p<0.05),绿原酸和甘草素的AUC(0-∞)值差异显著(p<0.05);两组间Tmax值和CL值均无显著性差异(p>0.05),表明怀牛膝对通塞脉微丸中4种主要活性成分在大鼠体内药代动力学行为有不同程度的影响。在“加减怀牛膝对通塞脉微丸主要活性成分组织分布的影响研究”中,建立了UPLC-MS/MS同时测定大鼠各组织中8种成分的分析方法,通过对通塞脉微丸中8种成分在组织中的定量分析来研究加减怀牛膝对各成分在组织中分布的影响。结果表明,从总体时间点各成分的分布来看,去掉怀牛膝后的通塞脉方中各成分在组织中药物分布浓度要比加牛膝组高。通过组织分布的对比实验结果,加减怀牛膝对各成分在各组织中有着不同程度的影响作用,可以从一个方面来揭示通塞脉方舍去怀牛膝的科学合理性。本论文通过文献研究和实验研究两个方面,对怀牛膝“性善下行”的药性特征展开实验研究,完成了取舍怀牛膝不同通塞脉组方在体内外化学成分的比较分析,通过对体外化学成分及体内药动学和组织分布的影响分析,初步揭示了怀牛膝“性善下行”的药性特征与体内内源性与外源性物质特异性分布之间相关性的科学内涵,同时也揭示了名优中成药通塞脉方舍去怀牛膝治疗缺血性脑卒中的科学合理性。
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