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研究目的:观察神经生长因子（NGF）在人脑胶质瘤中的表达及亚细胞定位情况,探讨其与胶质瘤生物学行为的关系,并利用NGF在胶质瘤中特异性核转位的现象,以NGF为“载体”,125I为“弹头”,制备细胞核靶向抗胶质瘤药物125I-NGF并评价其体外抗肿瘤活性。研究方法:（1）以胶质瘤细胞株U251为研究对象,通过免疫荧光染色,免疫印迹等方法观察NGF的亚细胞定位,探讨其分布模式随细胞周期变化的关系。（2）通过MTT试验观察NGF对U251细胞生长的影响。（3）以临床手术切除的人脑胶质瘤标本为研究对象,通过免疫组织化学染色及免疫印迹等方法观察NGF的核转位情况,结合临床资料分析NGF的核转位发生率与胶质瘤恶性程度及患者预后的相关性。（4）采用联结标记法将俄歇电子发射体125I与NGF进行偶联得到251I-NGF。通过平板克隆形成试验观察给药后胶质瘤细胞的增殖能力、流式细胞仪检测各细胞周期细胞比例、彗星试验及微核形成试验观察胶质瘤细胞DNA损伤情况,评价（125）I-NGF的体外抗胶质瘤活性。研究结果:（1）NGF在胶质瘤细胞株U251中存在多靶点分布模式,在G1期,U251细胞合成并分泌36kDa NGF出细胞;S期U251细胞摄取NGF并将其转运进核;M期,NGF与γ-tublin共定位于中心体,P-TrkA与α-tublin共定位于纺锤丝。（2）通过MTT试验我们发现外源性NGF处理的U251细胞增殖加快;NGF抗血清中和细胞外分泌型NGF后,细胞增殖减慢。（3）在临床手术切除的胶质瘤组织中,我们发现NGF亦存在核转位现象,并且病理分级恶性度高或预后不良者NGF核转位率都较高。胶质瘤组织蛋白样品及脑脊液免疫印迹检测结果显示:高恶性度的胶质瘤组织及脑脊液中NGF含量较高。（4）通过联结标记法将放射性核素125I与NGF偶联得到的产物125I-NGF在体外性质稳定,可以转位进入U251细胞核内,并且表现出G1/S期特异性抗胶质瘤活性,联合应用羟基脲可以增强其抗胶质瘤疗效。结论:1.NGF在人脑胶质瘤细胞株U251中的亚细胞定位存在明显的细胞周期特异性。2.无论外源性还是内源性NGF都具有显著的促进胶质瘤细胞生长作用。3.在临床胶质瘤手术标本中,同样存在NGF核转位现象,并且病理分级恶性度高或预后不良者NGF核转位率都较高。检测胶质瘤组织中NGF核转位率可以作为胶质瘤预后判断的指标,并且检测脑脊液中NGF含量可以用于胶质瘤早期诊断及术后病情监测。4.125I-NGF可以作为G1/S期特异性细胞核靶向抗胶质瘤药物。联合应用羟基脲可以增强其对胶质瘤细胞的杀伤效率。