板栗疫病菌自噬蛋白Atg8与病毒蛋白P40、P48及He1的定位研究

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低毒病毒-板栗疫病菌系统是研究病毒与宿主相互作用的一个优秀生物模式系统,该系统已经被普遍的应用在与病毒相关的靶基因和宿主因子的生物研究。细胞自噬在真核生物中都是非常保守的,其功能和功能障碍在微生物感染、老化及神经退化起着非常重要的作用。在板栗疫病菌中,敲除atg8基因的突变株不仅致病力明显降低,其接种低毒病毒后病毒累积量与EP713相比也明显降低。本研究构建了重组质粒载体pCPXG418-atg8-RFP,并将这个质粒转化 pCPXHY2-p40-GFP/EP155、pCPXHY2-p48-GFP/EP155及 pCPXHY2-hel-GFP/EP155 的原生质体,获得转化株 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY2-p40-GFP、pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY2-p48-GFP 及 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY2-hel-GFP。这些转化株在PDA平板上的表型与野生型菌株EP155相比均没有显著的变化。通过荧光显微镜的观察,发现自噬蛋白Atg8与病毒蛋白P40、P48及Hel共定位在板栗疫病菌的自噬泡内。本研究为揭示自噬蛋白Atg8与病毒蛋白P40、P48及Hel是否存在相互作用提供了一定依据。
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