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急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性白血病的一种特殊亚型,全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)可通过诱导早幼粒细胞分化、凋亡使该病缓解,是白血病药物治疗的新的里程碑。但两者治疗中的毒副作用促使科技工作者不断研究开发新的衍生物以进一步减少副反应增加疗效。我们前期文献阅读中发现柠檬醛(Citral)有抗部分肿瘤细胞的作用,而对正常胸腺细胞和脾细胞则低毒性作用或无影响,柠檬醛本身还是个极好的抗真菌药物。故设计本实验以了解柠檬醛对急性早幼粒细胞白血病的作用。本研究证实了柠檬醛有诱导NB4细胞凋亡的作用。为开展下一步研究工作奠定了基础。为新药物的研制展开新的领域。目的:本实验探讨柠檬醛(Citral)对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞生长抑制与诱导凋亡的作用并与不同浓度As2O3进行对比及柠檬醛引起NB4细胞凋亡可能的机制,为进一步的研究及新药开发奠定基础。方法:1.采用光学显微镜观察药物作用后NB4细胞形态的变化。2.使用台盼蓝染色法观察NB4细胞培养生长情况及使用柠檬醛作用后细胞变化情况。3.采用CCK-8比色法检测不同浓度的柠檬醛和As2O3对NB4细胞增殖的影响以及相同浓度柠檬醛作用不同时间后对细胞增殖的影响;4.使用流式细胞仪检测不同浓度柠檬醛和As2O3作用于NB4细胞后早期凋亡和晚期凋亡情况以及相同浓度的柠檬醛作用不同时间后对细胞凋亡影响。5.使用Rh123/PI双染法检测柠檬醛作用于NB4细胞后,线粒体膜电位改变情况。结果:1.细胞毒性试验显示柠檬醛对NB4细胞具有明显毒性,且细胞毒性作用与柠檬醛的剂量和作用时间成正相关。2.光学显微镜下可观察到20μg/ml柠檬醛作用细胞8小时后呈现单个细胞体积缩小但细胞膜完整,染色质密集成斑块状、边缘化,细胞核裂解为一个或数个致密体和凋亡小体形成等典型的细胞凋亡形态。3.流式细胞术(FCM)结果表明柠檬醛诱导NB4细胞发生凋亡,这种诱导凋亡作用与柠檬醛浓度和作用时间成正相关。4.柠檬醛作用于NB4细胞后,细胞内线粒体膜电位明显下降。结论:柠檬醛对NB4细胞具有明显杀伤作用,这种杀伤作用本质为诱导NB4细胞凋亡。柠檬醛对NB4细胞的毒性作用和诱导凋亡作用与药物浓度、作用时间成正相关。柠檬醛使NB4细胞内线粒体膜电位崩溃可能是引起细胞凋亡的机制之一