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目的：观察氯胺酮预处理对兔肺缺血再灌注损伤的影响.
方法：健康日本大耳白兔70只随机分成3组:假手术组(c组),肺缺血再灌注组(ischemia-reperfusion,IR组),肺缺血再灌注+氯胺酮组(ketamine,KET)(KET组).C组10只兔观察六小时.KET组和IR组缺血1小时后根据再灌注时间不同又分为三个亚组,分别为再灌注后1h、3h、5h组,每组10只.麻醉后左侧开胸,游离左肺门,穿过阻断带.IR组:阻断肺门1h,松开阻断带分别再灌注相应时间,复制在体原位单肺缺血再灌注模型;C组:左肺门过阻断带后不阻断肺门;KET组:缺血前五分钟按10mg/kg氯胺酮静脉注射,余同IR组.各组在缺血前20min,再灌注1h、3h、5h即刻抽取动脉血检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.各时间点实验结束时,取肺组织测湿干重比(W/D),TLINEL法检测细胞凋亡变化并测量凋亡指数(AI),光镜观察肺组织形态学改变及计算肺泡损伤率(IAR),电镜观察肺组织超微结构的改变,原位杂交法观察caspase-3mRNA的表达部位及强度.
结果：1.IR组和KET组血浆TNF-a含量随再灌注时间延长逐渐升高,两者显著高于C组(均P<0.01),但KFT组较IR组上升缓慢(均/K0.01).
2.IR组和KFT组血浆SOD活力随再灌注时间的延长而逐渐下降,但KET组下降的程度较IR组低(P<0.01或P<0.05).
3.IR组和KET组血浆MDA含量均随再灌注时间的延长而逐渐上升,两者显著高于C组(均P<0.01),但KET组上升较IR组缓慢(均P<0.01).
4.TR组和KET组NO含量与C组相比明显下降(均P<0.01),但KET组下降较IR组缓和(P<0.01或P<0.05).
5.肺湿干重比与肺泡损伤率IR组和KET组均比C组显著升高(P<0.01),但KET组明显低于IR组(P<0.01).
6.IR组、KET组的凋亡指数与CaSpase-3mRNA表达的光密度值各时间点均比C组为高(P<0.01),但KET组相对IR组两者都有明显减轻(P<0.01或P＜0.05).
7.原位杂交caspase-3mRNA表达和细胞凋亡在肺小动脉内膜、薄壁小血管(主要是肺小静脉)及部分血管平滑肌和部分气道上皮强阳性表达;吸光度测定值在三组相同时间点比较均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).
8.光镜观察:IR组的肺泡及毛细血管内可见大量白细胞和红细胞聚集,肺间质水肿明显,肺泡腔内有大量渗出液;KFT组水肿程度明显减轻,炎症细胞侵润减少,肺泡内红细胞渗出减少,肺泡较完整;C组肺泡腔内未见渗出,视野清晰.
9.电镜观察:C组肺间质及肺泡结构保持完整,无明显受损,未见明显炎性细胞浸润;IR组损伤严重,表现为线粒体和内质网空泡化,肺细小动脉、静脉、毛细血管的内皮细胞肿胀及基底膜增宽;Ⅱ型肺泡上皮细胞绒毛消失,核膜间隙扩大,细胞核深染、固缩.相比之下,KFT组的Ⅱ型肺泡上皮细胞绒毛较多,线粒体和内质网空泡化减少.
结论：1.肺缺血再灌注损伤可激活OFRMDA、促炎因子TNF-a的产生、下调No含量,增加caspase-3mRNA表达,诱导细胞凋亡.
2.氯胺酮可通过降低血浆、TNF-a含量,提高NO含量,下调caspase-3mRNA表达,减轻缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡并保护肺组织.